時間：2023-03-17 18:00:14
緒論：在尋找寫作靈感嗎？愛發(fā)表網(wǎng)為您精選了8篇水產(chǎn)養(yǎng)殖論文，愿這些內(nèi)容能夠啟迪您的思維，激發(fā)您的創(chuàng)作熱情，歡迎您的閱讀與分享！
1.1魚塘清淤
魚、蝦、蟹等經(jīng)1年的飼養(yǎng)后，池底往往沉積著大量的食物殘渣和排泄物，這些有機(jī)廢物經(jīng)腐爛、分解后在池底形成淤泥，而淤泥是細(xì)菌很好的培養(yǎng)基。因此，當(dāng)淤泥沉積到一定厚度時，必須及時清除。銀鯽類的出血病及羅氏沼蝦、青蝦等細(xì)菌性病害的發(fā)病率的上升與池底淤泥不及時清理有一定的關(guān)系。按國外對蝦養(yǎng)殖經(jīng)驗來看，高密度蝦類養(yǎng)殖，最好每年將池底的1層浮泥予以清除，其目的也是去除細(xì)菌滋生所需的營養(yǎng)源。另外，淤泥中有大量的寄生蟲卵及孢子等，挖除多余的淤泥亦可大大減低侵襲性病害的發(fā)生率。一般來講，池底淤泥厚度只需15cm左右即可。這樣既使水體有一定肥度培育浮游生物，滿足水產(chǎn)養(yǎng)殖類對天然餌料的需求，又可減少致病菌的滋生場所和細(xì)菌密度。因此，每年對魚池清整時，必須清除池底多余的淤泥。
1.2池底曝曬與冰凍
池底每年需經(jīng)15d左右的曝曬和冰凍，一是改良池底的土質(zhì)，二是使池底淤泥中的致病菌和寄生蟲卵及孢子的密度下降。池底經(jīng)曝曬和冰凍的魚池，養(yǎng)殖病害的發(fā)病率明顯下降。但池底干枯時間過長則易引起草荒。
1.3藥物清塘
生石灰清塘可有效地殺滅致病菌、寄生蟲及孢子等，同時可改善池底土質(zhì)。
2放養(yǎng)健壯苗種
選擇的標(biāo)準(zhǔn)：體質(zhì)健壯，無畸型苗，且規(guī)格均勻。體表、鰭條或附肢無炎癥，無爛鰓、白肝等異常病癥。苗種游動（或爬行）靈活，無病態(tài)。有條件的單位或個人可用顯微鏡對體表、鰓、肝等部位取樣進(jìn)行鏡檢，應(yīng)無寄生蟲或致病菌。對羅氏沼蝦和南美白對蝦來講，應(yīng)選購經(jīng)過檢疫不帶病毒的蝦苗。
3種苗放養(yǎng)前藥浴
對魚類可用15~20mg/kg濃度的高錳酸鉀溶液藥浴15~20min，具體視魚類對藥物的忍受力而定。蟹種放養(yǎng)前，在水溫5~8℃時，用高錳酸鉀20g/m3浸洗3~5min，或用3%~5%的食鹽水溶液藥浴消毒，用來殺滅河蟹體表上的細(xì)菌和寄生蟲。蝦苗進(jìn)池后即用二溴海因等（濃度達(dá)0.3mg/kg）進(jìn)行全池潑灑4食臺或食場消毒
用250g左右的漂白粉對水，潑灑在食臺或食場的周圍，一般從4~9月每月2次；石灰輕消可有效地抑制致病菌，并可及時補(bǔ)充水體中的鈣質(zhì)，使水體常年呈偏堿性。這對養(yǎng)特種品甲殼類尤為重要。生石灰輕消方法：常規(guī)養(yǎng)魚池一般每米水深為225kg/hm2，特種水產(chǎn)品（如鱖魚、蝦、蟹等）一般每米水深為75~105kg/hm2。
5選購優(yōu)質(zhì)配合餌料
要求顆粒均勻、水中穩(wěn)定性好、營養(yǎng)全面、餌料系數(shù)低等，并添加誘食劑及穩(wěn)定維生素C等，促進(jìn)養(yǎng)殖品種的攝食、消化和吸收，促進(jìn)其生長，增強(qiáng)抗病力，提高成活率。要注意投喂飼料的科學(xué)性，不要投喂單一飼料，避免缺少某種營養(yǎng)元素而引起營養(yǎng)性疾病。如蝦、蟹養(yǎng)殖中，除投喂動物性餌料和全價配合飼料外，還應(yīng)保證充足的植物性飼料。
6采用生物調(diào)控水質(zhì)
采用生物調(diào)控水質(zhì)，確保有一個良好的生態(tài)環(huán)境，從而提高魚、蝦、蟹等水產(chǎn)品的體質(zhì)和抗病力。生物調(diào)控水質(zhì)可采用種植水草、放養(yǎng)螺螄、添加有益菌和培育浮游生物（如施肥）等?？筛鶕?jù)養(yǎng)殖品種選擇相應(yīng)的生物調(diào)控法。浮游植物的光合作用能使水體富含氧氣，減少氨氮、硫化氫等有毒物質(zhì)的生成，創(chuàng)造良好的生態(tài)環(huán)境，抑制致病微生物的滋生。定期用有益活性微生物制劑施放光合細(xì)菌、復(fù)合型活菌生物凈水劑（如西菲利）等，它們在水體中能快速將有機(jī)物質(zhì)徹底分解成單細(xì)胞藻類可利用的無機(jī)營養(yǎng)鹽，減輕有機(jī)廢棄物的污染，而本身對養(yǎng)殖品種無害，同時自身在水體中能迅速繁殖生長形成優(yōu)勢菌群，通過食物、場所競爭及分泌類抗生素物質(zhì)，直接或間接抑制有害菌群的繁殖生長。生物調(diào)控水質(zhì)的方法可減少池水排換量，從而減少從外界水源帶來的污染。研究和實踐證明，通過大排大灌換水的方法改善底質(zhì)，效果不佳，會造成南美白對蝦生長不適，應(yīng)激生病。
7配套增氧機(jī)械
通過增氧機(jī)的打水作用，增加水體的溶解氧，使底質(zhì)中的有機(jī)物和水中魚、蝦、蟹的排泄物及殘餌等充分氧化分解成單細(xì)胞藻類所需的無機(jī)營養(yǎng)鹽，減少有機(jī)廢棄物的污染，保持水質(zhì)條件良好，從而避免誘發(fā)疾病的應(yīng)激條件產(chǎn)生。
8掌握病害發(fā)病規(guī)律
掌握某些水產(chǎn)養(yǎng)殖病害的發(fā)病規(guī)律，定期在水體中施用藥物或投喂藥餌，殺滅病菌，減少致病因素，但需注意藥物的拮抗作用和協(xié)同作用，并且不能與微生物制劑同時使用。如銀鯽的出血癥，在發(fā)病季節(jié)每隔15~20d對水體消毒1次，并投喂藥餌2~3d。
論文關(guān)鍵詞水產(chǎn)養(yǎng)殖；病害預(yù)防；魚塘清整與消毒；藥??；食場消毒
論文摘要總結(jié)了水產(chǎn)養(yǎng)殖中病害的預(yù)防措施，包括魚塘清整與消毒、放養(yǎng)健壯苗種、種苗放養(yǎng)前藥浴、食臺或食場消毒、選購優(yōu)質(zhì)配合餌料、采用生物調(diào)控水質(zhì)、配套增氧機(jī)械、掌握病害發(fā)病規(guī)律等內(nèi)容，以供水產(chǎn)養(yǎng)殖者參考。
1.選擇本市各轄區(qū)10個池塘循環(huán)水養(yǎng)殖單位，主養(yǎng)面積5874畝，凈化區(qū)面積540畝，主養(yǎng)品種分別為河蟹、青蝦、翹嘴鲌、銀鯽、青魚、草魚等。凈化區(qū)分為池塘、溝渠兩種類型，分別種植浮萍、水花生、空心菜、菖蒲、美人蕉、蘆葦、輪葉黑藻等浮水、挺水、沉水類水生植物。根據(jù)包含的水生植物種類的差異，細(xì)分為單一型(單一類型)、雙組型(兩種類型)和復(fù)合型(三種類型)，根據(jù)種植密度的差異，按30%以下、30%～70%、70%以上密度劃分。凈化區(qū)除種植水生植物外，還放養(yǎng)一定量的鰱鳙魚、黃尾鲴、螺蚌等水生動物。
2.選擇長蕩湖網(wǎng)圍養(yǎng)殖戶3個，養(yǎng)殖面積55畝，主養(yǎng)河蟹，套養(yǎng)鰱鳙魚、黃尾鲴、螺等，種植浮萍等水生植物。
3.主養(yǎng)品種放養(yǎng)規(guī)格、密度、餌料投喂、疾病防控、增氧換水、養(yǎng)殖管理等均按各自模式不變。
4.在8月初持續(xù)高溫季節(jié)，對池塘循環(huán)水凈化區(qū)凈水口與網(wǎng)圍養(yǎng)殖區(qū)進(jìn)行抽樣，委托檢測機(jī)構(gòu)檢測pH、化學(xué)需氧量、氨氮、總磷、總氮、亞硝酸鹽等指標(biāo)。
5.在9月初，對池塘循環(huán)水養(yǎng)殖單位、長蕩湖網(wǎng)圍養(yǎng)殖戶及其周邊養(yǎng)殖單位(戶)高溫?fù)p失情況進(jìn)行統(tǒng)計；在11月，對池塘循環(huán)水養(yǎng)殖單位和長蕩湖網(wǎng)圍養(yǎng)殖戶產(chǎn)量、產(chǎn)值、效益情況進(jìn)行測產(chǎn)統(tǒng)計。
6.采用SPSS數(shù)據(jù)分析軟件對檢測數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析。表中數(shù)據(jù)以M(平均值)、SE(標(biāo)準(zhǔn)差)表示。
二、結(jié)果與分析
1.不同的種草水域中，pH值網(wǎng)圍組高于池塘組，差異極顯著(p＜0.01)，溝渠組高于池塘組，差異顯著；化學(xué)需氧量網(wǎng)圍組顯著低于池塘組與溝渠組；氨氮網(wǎng)圍組顯著低于池塘組；總磷、總氮網(wǎng)圍組最低，亞硝酸鹽溝渠組最低，但各組差異均不顯著(p＞0.05)。
2.溝渠組、網(wǎng)圍組高溫?fù)p失低于池塘組，網(wǎng)圍組高溫?fù)p失最低，各組間差異不顯著；池塘組與周邊同比減損最高，溝渠組次之，網(wǎng)圍組最低，池塘組與網(wǎng)圍組差異極顯著，溝渠組與網(wǎng)圍組差異顯著；總的畝均利潤溝渠組高于池塘組、網(wǎng)圍組，差異均極顯著；成本利潤率溝渠組最高，網(wǎng)圍組次之，池塘組最低，各組間差異均不顯著。
3.pH值各組間差異不顯著；化學(xué)需氧量水生植物單一型最低，與雙組型差異顯著，與復(fù)合型差異不顯著；氨氮單一型最低，雙組型最高，兩組差異顯著；總磷、總氮、亞硝酸鹽各組間差異不顯著。
4.高溫?fù)p失復(fù)合型高于雙組型和單一型，各組間差異不顯著；同比減損復(fù)合型最高，雙組型次之，單一型最低，復(fù)合型與單一型差異極顯著，雙組型與單一型差異顯著；總畝利雙組型高于復(fù)合型、復(fù)合型高于單一型，各組間差異不顯著；本利率雙組型較高，各組間差異不顯著。
5.各組間pH值、化學(xué)需氧量、氨氮、總磷、總氮、亞硝酸鹽差異均不顯著。其中30%以下組pH值最高，化學(xué)需氧量、總磷、總氮最低，70%以上組氨氮、亞硝酸鹽最低。
6.30%以下組高溫?fù)p失最低，30%～70%組高溫?fù)p失最高，兩組差異顯著；70%以上組同比減損最高，30%以下組最低，各組間差異不顯著；70%以上組總畝利最高，30%以下組總畝利最低，差異不顯著；30%～70%組本利率高于其他兩組，差異不顯著。
三、小結(jié)與討論
1.綜合結(jié)果表明，池塘循環(huán)水養(yǎng)殖凈化區(qū)與網(wǎng)圍養(yǎng)殖區(qū)經(jīng)水生植物凈化后的pH、氨氮、總氮、總磷等水質(zhì)指標(biāo)均達(dá)到《太湖流域池塘養(yǎng)殖水排放標(biāo)準(zhǔn)》一級和《地表水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》Ⅲ類水標(biāo)準(zhǔn)，COD達(dá)到《太湖地區(qū)城鎮(zhèn)污水處理廠主要水污染物排放限值》和《地表水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》Ⅴ類水標(biāo)準(zhǔn)，因此，經(jīng)水生植物處理的養(yǎng)殖水符合排放要求，也可滿足循環(huán)養(yǎng)殖用水要求。
2.湖泊網(wǎng)圍水域水質(zhì)優(yōu)于池塘循環(huán)水凈化區(qū)，池塘循環(huán)水溝渠型凈化區(qū)水質(zhì)好于池塘型。網(wǎng)圍養(yǎng)殖高溫?fù)p失、同比減損均較少，總畝利和本利率較高，可認(rèn)為高溫期間網(wǎng)圍養(yǎng)殖水位、水溫、光照條件的改變更適于水草生長，湖水自凈能力增強(qiáng)，受高溫干旱影響較?。怀靥裂h(huán)水養(yǎng)殖中，溝渠組高溫?fù)p失較低，總畝利和本利率高于池塘組，同樣是由于溝渠蓄水量大于池塘，加上水草的凈化作用，保障了足量優(yōu)質(zhì)水源，而池塘組同比減損最高，表明在凈化區(qū)水量偏少的情況下，種草仍然能夠起到較好的抗高溫作用。
3.水生植物單一型和復(fù)合型處理水質(zhì)較好，單一型水生植物構(gòu)成均為浮水植物，表明浮水植物處理水質(zhì)效果較好，而雙組型、復(fù)合型水質(zhì)處理效果并不優(yōu)于單一型，這與沉水類植物在富營養(yǎng)化的水質(zhì)中生存能力弱有關(guān)。復(fù)合型同比減損顯著高于雙組型，說明復(fù)合型水草應(yīng)對高溫干旱天氣能力強(qiáng)，但總畝利和本利率略低于雙組型，說明種植和管護(hù)成本相對更高。凈化區(qū)水生植物栽種類型仍需要深入研究。
1.1殘餌、排泄物、分泌物
人類在進(jìn)行水產(chǎn)養(yǎng)殖中，尤其是一些池塘養(yǎng)殖，水產(chǎn)養(yǎng)殖生物的營養(yǎng)能量來源是人工投餌，但不可避免的是人類投餌的食物并不能完全被養(yǎng)殖生物所吸收，就會導(dǎo)致無法被養(yǎng)殖生物所食的餌料排泄物及分泌物溶解出來的營養(yǎng)鹽和有機(jī)質(zhì)污染環(huán)境，這些有機(jī)物在淡水中進(jìn)行分解轉(zhuǎn)化會消耗大量的溶解氧，直接引起魚蝦貝類生長受抑、餌料系數(shù)降低，嚴(yán)重的還會出現(xiàn)窒息死亡。有機(jī)物的氨化作用會產(chǎn)生氨，氨會轉(zhuǎn)變成亞硝酸鹽，這是導(dǎo)致水產(chǎn)動物發(fā)生疾病的重要因素，比如一定數(shù)量的分子氨會直接損失魚鰓表皮細(xì)胞，降低魚類的免疫力。
1.2化學(xué)農(nóng)藥、抗生素、飼料添加劑
在淡水水產(chǎn)養(yǎng)殖中，人類為了加快促進(jìn)生物的生長，維持水體的環(huán)境相對穩(wěn)定性，防治病害的發(fā)生，會使用一些化學(xué)農(nóng)藥、抗生素和飼料添加劑，這些是現(xiàn)代水產(chǎn)養(yǎng)殖中非常重要的技術(shù)手段，但不可忽視的是，由于人為主觀原因，導(dǎo)致了化學(xué)農(nóng)藥和抗生素的濫用，加上沒有合理和使用搭配飼料添加劑，也會導(dǎo)致是殘留和積累的水產(chǎn)品在水域中。
2治理措施
2.1科學(xué)規(guī)劃水產(chǎn)養(yǎng)殖面積
我國集約化水產(chǎn)養(yǎng)殖主要采取集約化形式是多余的飼料的一個主要原因，飼料大量過量的水遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過他們的純化，污染水環(huán)境，因此科學(xué)合理的養(yǎng)殖區(qū)規(guī)劃。水產(chǎn)養(yǎng)殖部門可以根據(jù)水體不同的使用功能科學(xué)規(guī)劃養(yǎng)殖水面。充分考慮水水產(chǎn)養(yǎng)殖和水承載能力的負(fù)載能力等重要因素，在保護(hù)海洋環(huán)境沒有污染，水產(chǎn)養(yǎng)殖面積的科學(xué)規(guī)劃，制定合理的飼養(yǎng)密度的前提。
2.2提高水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)
水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)的研究已經(jīng)取得了一些進(jìn)展，如凈化廠工程，工程技術(shù)，魚菜共生，貝類養(yǎng)殖處理污水工程技術(shù)、系統(tǒng)工程技術(shù)以及生物凈化工程技術(shù)。治理水域環(huán)境的重大舉措是修復(fù)水域生態(tài)環(huán)境，它的特點是投資少、沒有二次污染，保證了水產(chǎn)養(yǎng)殖的良好水環(huán)境，市場發(fā)展前景較大，是獲得良好水環(huán)境的重要保證，其市場與發(fā)展前景廣闊，是治理養(yǎng)殖污染水體價值較高的生物工程技術(shù)。
2.3加強(qiáng)水產(chǎn)養(yǎng)殖管理
不可否認(rèn)的是我國水產(chǎn)養(yǎng)殖雖然取得一定的經(jīng)濟(jì)效益，但一定程度上污染了水域環(huán)境，養(yǎng)殖管理手段違背了經(jīng)濟(jì)、環(huán)境可持續(xù)發(fā)展觀，人類必須要樹立只有在保護(hù)水域環(huán)境不受污染的前提下，實施水產(chǎn)養(yǎng)殖，水產(chǎn)養(yǎng)殖才能地促進(jìn)社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展的可持續(xù)發(fā)展觀念。水產(chǎn)品規(guī)范養(yǎng)殖需要相關(guān)法律法規(guī)保障，現(xiàn)階段我國缺乏完善的水產(chǎn)養(yǎng)殖法律法規(guī)，對水產(chǎn)養(yǎng)殖監(jiān)督不夠，所以相關(guān)部門要加快制定相關(guān)水產(chǎn)養(yǎng)殖一系列法律法規(guī)的步伐，制定相關(guān)獎懲措施，嚴(yán)格管理機(jī)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)。
2.4建立健全水產(chǎn)養(yǎng)殖法律法規(guī)
依據(jù)我國國情，參考和借鑒國外發(fā)達(dá)國家在水產(chǎn)養(yǎng)殖方面的管理經(jīng)驗，制定符合我國國情的法律法規(guī)，科學(xué)合理規(guī)劃水產(chǎn)養(yǎng)殖面積及養(yǎng)殖品種，建立漁業(yè)用藥限制和養(yǎng)殖廢水排放標(biāo)準(zhǔn)，加強(qiáng)監(jiān)管漁藥使用和養(yǎng)殖廢水排放，加大對漁藥濫用違規(guī)行為的懲罰力度。近幾年來，我國陸續(xù)頒布了《中華人民共和國漁業(yè)法》、《中華人民共和國農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全法》，一定程度上規(guī)范了我國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。
2.5提高水產(chǎn)養(yǎng)殖人員素質(zhì)
現(xiàn)階段我國從事水產(chǎn)養(yǎng)殖人員的綜合素質(zhì)較低，主要表現(xiàn)在水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)方面及總體受教育程度上，這些人員缺乏保護(hù)環(huán)境和保護(hù)水域的意識，這樣就認(rèn)為的導(dǎo)致了水域環(huán)境污染較嚴(yán)重。要提高水產(chǎn)養(yǎng)殖人員的素質(zhì)，政府可以通過地方水產(chǎn)技術(shù)推廣站等單位舉辦培訓(xùn)班或講座，將最新養(yǎng)殖技術(shù)和環(huán)境政策法規(guī)分步驟傳授給漁民，提高漁民的環(huán)境保護(hù)意識，樹立水產(chǎn)養(yǎng)殖的可持續(xù)發(fā)展意識。
2.6凈化水體處理方法
2.6.1物理處理法
物理處理法是一種比較初級的處理方法，物理處理法的原理是根據(jù)水體和相關(guān)污染物的理化性質(zhì)，通過機(jī)械的方法凈化水體，該方法普及度相對較高?，F(xiàn)階段人類比較常用的有沉淀法、過濾法、泡沫分離法、吸附法、逆滲透法、曝氣法等對于懸浮顆粒物較多的水質(zhì)，可采用沉淀法、過濾法、泡沫分離法進(jìn)行處理；如果如水，氨，亞硝酸鹽，硫化氫等有毒物質(zhì)，可使用吸附法利用多孔固相物質(zhì)除去吸附的有毒物質(zhì)，常用的多孔性固相物質(zhì)包括活性炭、硅膠、沸石、浮石粉等；水，如果有害氣體，如氨和氯的存在，可使用水，曝氣方法來改變曝氣，去除有害氣體。
2.6.2化學(xué)處理法
化學(xué)處理法主要效果是去除水體中的有害離子，常用方法有凝聚法、氧化處理法、離子交換法、絡(luò)和法以及中和法、消毒殺菌劑法等等，其中以氧化處理法的應(yīng)用最為普遍，該方法利用各種氧化劑氧化水體中的化學(xué)物質(zhì)，氧化劑有臭氧、漂白粉、高錳酸鉀等，其中臭氧的應(yīng)用范圍最廣、處理效果最好。氧化處理過程中所采用的氧化劑不僅可以消毒、殺菌，而且其本身所具備的氧化性還可以與有機(jī)物、具有還原性的物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，去除有害離子。
3淡水水產(chǎn)養(yǎng)殖可持續(xù)發(fā)展
本品為黑紫色、細(xì)長的棱型結(jié)晶或顆粒，帶藍(lán)色金屬光澤，無臭味，在空氣中穩(wěn)定。本品為強(qiáng)氧化劑，易溶于水，遇有機(jī)物、熱、酸性或堿性并釋放出新生態(tài)氧或稱初生態(tài)氧，從而呈現(xiàn)出極強(qiáng)的殺菌、殺蟲、除臭、氧化、解毒、止血和收斂功效。
2常規(guī)應(yīng)用
高錳酸鉀在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的防治對象主要為魚類的細(xì)菌性疾病以及水生生物的真菌性病害，如魚類水霉病、鱉和蛙的膚霉病；鰻魚弧菌病、爛鰓病、爛尾病、赤鰭病等；蝦絲狀細(xì)菌病、幼體粘污病、黃鰓病、蝦蟹鏈壺菌病等；魚類中華鳋病、錨頭鳋病、指環(huán)蟲病、三代蟲病、鯉嗜子宮線蟲病、車輪蟲病、口絲蟲病等，采用的方法主要有浸泡法和潑灑法。2．1浸泡法目前最常用的范圍之一，主要用于魚種放養(yǎng)時魚體浸泡消毒、殺蟲，以及防止魚卵孵化早脫膜，常見用量為10～20mg／L，浸泡15～30min，但往往實際生產(chǎn)中浸泡魚體的容器水量、藥液濃度、浸泡時間憑經(jīng)驗掌握。2．2潑灑法用于養(yǎng)殖水體大面積潑灑殺蟲和消毒。因高錳酸鉀受水體有機(jī)物影響作用效果而降低，以及用量較大（2～5mg／L），高錳酸鉀的價格較高，用藥成本不劃算，故一般大面積水體應(yīng)用較少，僅用于一些小水面的名貴水產(chǎn)品養(yǎng)殖。3特殊功效養(yǎng)殖水體“轉(zhuǎn)水”的急救、增氧、解毒。“轉(zhuǎn)水”在北方地區(qū)水產(chǎn)養(yǎng)殖中時有發(fā)生，因受水源條件限制，水體有機(jī)物含量高，使水體富營養(yǎng)化，藻類大量繁殖，一遇天氣突變或營養(yǎng)鹽類供給不足，藻類大量死亡，即“轉(zhuǎn)水”或稱“倒水”現(xiàn)象，造成水體嚴(yán)重缺氧，氨氮、亞硝酸鹽偏高，水色由濃變清，有的甚至清澈見底，有濃烈果腥臭味。養(yǎng)殖魚類生命受到威脅，有的甚至全軍覆滅，損失慘重。目前采取的應(yīng)急措施主要有：①向水體加注新水，但北方地區(qū)普遍存在加注新水困難。注水在水產(chǎn)養(yǎng)殖中是一種急救措施，不定期或臨時向水體加注水，要求進(jìn)水量大、時間速度快，增加溶解氧，稀釋有害物質(zhì)濃度。注水僅對養(yǎng)殖面積較小的魚塘起作用，對大水面作用甚微。加水是一種日常水質(zhì)調(diào)節(jié)措施，一般定期向水體加新水，對水量、速度沒有明顯要求，避免水質(zhì)老化。②向水體潑灑降解氨氮、亞硝酸鹽等藥品，如硝化菌、復(fù)合芽孢桿菌、吸附劑等，不能在短時間內(nèi)消除這些有害物質(zhì)，達(dá)不到急救作用。③向水體潑灑速效增氧劑或大粒氧，增加水體溶解氧，以緩解嚴(yán)重缺氧。因溶解氧受水溫、溶解度影響，快速釋放的氧氣形成微氣泡，釋放到空氣中，持續(xù)時間不長。④向水體潑灑解毒藥品，以解除有害藻類死亡釋放的毒素對養(yǎng)殖魚類的危害。目前大部分解毒藥品主要成分為有機(jī)酸或Vc類，對解除有機(jī)物等中毒效果不夠理想。筆者曾采用高錳酸鉀解救因“轉(zhuǎn)水”嚴(yán)重缺氧的案例，使養(yǎng)殖魚類轉(zhuǎn)危為安。案例1．天津市武清城關(guān)江××，養(yǎng)魚水面0．33hm2，因“轉(zhuǎn)水”嚴(yán)重缺氧，氨氮、亞硝酸鹽指標(biāo)偏高，24h不停開增氧機(jī)，用速效增氧劑替換增氧機(jī)，1h后又缺氧浮頭，連續(xù)七天得不到好轉(zhuǎn)，燒壞一臺增氧機(jī)。采用高錳酸鉀每米水深用3．75～7．5kg／hm2，稀釋到不染手指為宜，向浮頭嚴(yán)重的魚群潑灑，浮頭現(xiàn)象當(dāng)即消失。并通過藻類調(diào)濟(jì)接種，使水質(zhì)得到恢復(fù)。案例2．天津市武清白古屯楊××，0．67hm2養(yǎng)魚池氨氮、亞硝酸鹽偏高，養(yǎng)殖魚類以暗浮頭現(xiàn)象在水面集群游動，氣溫越高表現(xiàn)越明顯，連續(xù)五天得不到好轉(zhuǎn)。通過上述方法當(dāng)即消失，并結(jié)合肥水培養(yǎng)藻類使水質(zhì)恢復(fù)正常。案例
3．唐山市陡河水庫曾
××，養(yǎng)魚池0．53hm2，養(yǎng)殖高峰季節(jié)8月，池塘養(yǎng)殖魚類荷載量約17500kg，晚上21：00左右，水質(zhì)發(fā)黑有腥臭味，養(yǎng)殖魚類嚴(yán)重缺氧浮頭，不抱增氧機(jī)，扎塘邊，特別是上半夜，如不及時采取有效措施，就意味著有“泛池”危險，造成不可估量的損失。通過采用高錳酸鉀急救，備用7．5kg／hm2，上半夜用3．75kg／hm2按上述方法潑灑，養(yǎng)殖魚類及時恢復(fù)抱增氧機(jī)，就減輕了“泛池”死魚的危險，如下半夜有返彈，再用3．75kg／hm2潑灑，結(jié)果只用了一次，第二天水質(zhì)就恢復(fù)正常。
4分析原因
4．1改良水質(zhì)作用高錳酸鉀為強(qiáng)氧化劑，迅速氧化水中有機(jī)物質(zhì)，降低了以水呼吸為主的耗氧量，直接和間接起到了改良水質(zhì)的作用。4．2釋放初生態(tài)氧高錳酸鉀在水中釋放出初生態(tài)氧，與水分子結(jié)合成氧，避免了速效增氧劑因受水溫影響溶解度，形成微氣泡逸出水面，所以高錳酸鉀增氧持續(xù)時間長。國外有人把高錳酸鉀作為增氧劑使用，用10～15mg／L的高錳酸鉀全池潑灑，可使池水溶氧量提高1．5～5mg／L。4．3氧化有毒物質(zhì)高錳酸鉀可迅速氧化水中有毒物質(zhì)，如有害藻類分泌或死亡產(chǎn)生的毒素；氧化亞硝酸鹽；有機(jī)磷農(nóng)藥如敵百蟲、馬拉硫磷；有機(jī)硫農(nóng)藥如“福美”化合物類的福美鋅，“代森”類的代森銨等中毒。因此，人、畜因這類物質(zhì)中毒常采用1∶2000～1∶5000的高錳酸鉀溶液反復(fù)洗胃，以解除農(nóng)藥中毒。
5注意事項
枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌很早便被用于飼料，農(nóng)業(yè)部公告第1126號《飼料添加劑品種目錄》(2008)中微生物一欄依然只有這兩種，而2013年農(nóng)業(yè)部公告第2045號《飼料添加劑品種目錄》(2013)中微生物一欄則增加到6種，增加了用于養(yǎng)殖動物的遲緩芽孢桿菌和短小芽孢桿菌，用于肉雞、生長育肥豬和水產(chǎn)養(yǎng)殖動物的凝結(jié)芽孢桿菌及用于肉雞、肉鴨、豬和蝦的側(cè)孢短芽孢桿菌。此外，在允許添加的酶制劑中，還有淀粉酶、β－葡聚糖酶、麥芽糖酶、β－甘露聚糖酶、蛋白酶、角蛋白酶和木聚糖酶可由芽孢桿菌生產(chǎn)。相信隨著研究的進(jìn)一步深入，可用于飼料的芽孢桿菌種類會越來越多。芽孢桿菌在飼料加工、儲藏和飼喂中均有相應(yīng)的特性保證其活力和性能不減，依次為飼料加工時可在不利的環(huán)境條件下形成孢子，可耐高溫、耐酸堿和耐擠壓，可經(jīng)受制粒工藝的要求;儲存運(yùn)輸中處于休眠期的孢子不消耗飼料的營養(yǎng)成分，保證飼料品質(zhì)不降低;飼喂后芽孢進(jìn)入動物腸道，可耐受消化液，在適宜的環(huán)境下迅速萌發(fā)，此過程可產(chǎn)生多種酶類及代謝產(chǎn)物。此外，芽孢桿菌除了添加于飼料外，還可作為一種水質(zhì)調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)水體環(huán)境。
2飼用芽孢桿菌的益生功能研究進(jìn)展
2.1維持腸道微生態(tài)平衡
目前，關(guān)于芽孢桿菌維持腸道微生態(tài)平衡的機(jī)制，普遍認(rèn)可的主要有以下三個方面:一是生物奪氧?？莶菅挎邨U菌屬好氧性細(xì)菌，而病原菌也多為好養(yǎng)性細(xì)菌，枯草芽孢桿菌在腸道中的生長繁殖必然消耗氧氣，對病原菌造成頡頏作用，同時造成腸道厭氧環(huán)境，有利于腸道原籍優(yōu)勢菌繁殖，維持腸道正常生態(tài)平衡的作用;二是定植抗力?？莶菅挎邨U菌及因其生長繁殖更加有利的動物腸道原籍優(yōu)勢菌都會在腸道內(nèi)占據(jù)一定的位點，導(dǎo)致病原菌可結(jié)合位點減少，從而因無法定植而被排斥;三是產(chǎn)生抑菌物質(zhì)。芽孢桿菌生長繁殖中產(chǎn)生的乙酸、丙酸和丁酸等揮發(fā)性脂肪酸可降低動物腸道pH，從而有效抑制病原菌生長。此外因生長環(huán)境有利，一些原籍優(yōu)勢菌可產(chǎn)生更多的細(xì)菌素和類細(xì)菌素等抑菌代謝物。
2.2促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收
枯草芽孢桿菌進(jìn)入動物腸道后，能迅速在腸道中萌發(fā)并增殖，產(chǎn)生多種消化酶，增強(qiáng)動物腸道對飼料的消化能力，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用。芽孢桿菌不僅能產(chǎn)生蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等，還可誘導(dǎo)動物機(jī)體內(nèi)源消化酶的分泌，產(chǎn)生的非淀粉多糖酶可以降解內(nèi)源酶難以降解的植物性復(fù)雜糖類，如纖維素、果膠和葡聚糖等，有利于腸道更好地利用糖類，提高飼料轉(zhuǎn)化率。另外，枯草芽孢桿菌在生長代謝的過程中能產(chǎn)生其他多種營養(yǎng)物質(zhì)，如維生素、氨基酸和促生長因子，參與動物自身新陳代謝，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。
2.3增強(qiáng)機(jī)體免疫力
研究表明，芽孢桿菌可促進(jìn)動物免疫器官發(fā)育，加快免疫系統(tǒng)的成熟，T淋巴細(xì)胞及B淋巴細(xì)胞的數(shù)量增多，使動物腸道相關(guān)淋巴組織處于免疫準(zhǔn)備狀態(tài)。其機(jī)制可能是芽孢桿菌進(jìn)入動物腸道后，可作用于腸道集合淋巴結(jié)的抗原結(jié)合位點;此外，芽孢桿菌可通過調(diào)節(jié)動物腸道的微生態(tài)平衡，特別是對雙歧桿菌的調(diào)節(jié)，間接增強(qiáng)動物的免疫力。
3飼用芽孢桿菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用
腸道微生態(tài)的平衡是水產(chǎn)動物保持健康的重要保障，腸道微生態(tài)平衡一旦被打破，腸道環(huán)境會更利于病原菌的生長繁殖。當(dāng)前，集約化養(yǎng)殖帶來的水體負(fù)荷過大和水質(zhì)惡化等環(huán)境脅迫，極易導(dǎo)致水產(chǎn)動物腸道微生態(tài)失衡，使水產(chǎn)動物表現(xiàn)為病理狀態(tài)。因此，基于維護(hù)腸道微生態(tài)平衡的考慮，芽孢桿菌，尤其是枯草芽孢桿菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中得到了越來越廣泛的應(yīng)用。目前，芽孢桿菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用主要有以下兩種方式:直接投放于水體，起到改善水質(zhì)和頡頏病原菌的作用;添加于飼料中投喂，起到改善生長性能、增強(qiáng)免疫功能、調(diào)節(jié)腸道菌群及保護(hù)腸道黏膜組織形態(tài)等作用。
3.1作為水質(zhì)改良劑改善養(yǎng)殖水體的水質(zhì)
芽孢桿菌能及時分解水體中的有害污染物質(zhì)，將有機(jī)質(zhì)分解為小分子有機(jī)酸、氨基酸及氨為單胞藻提供營養(yǎng)，凈化和穩(wěn)定水質(zhì)。尹文林等(2006)研究發(fā)現(xiàn):枯草芽孢桿菌具有降解養(yǎng)殖水體氨氮、亞硝酸鹽氮和硫化物等作用。而張峰峰(2009)認(rèn)為:雖然能夠降低水體pH及顯著降低水中硝酸鹽和亞硝酸鹽含量，但不具有提高水體中溶氧含量和降低硫化物含量作用。趙迷淼等(2003)發(fā)現(xiàn):施用枯草芽孢桿菌后，對蝦養(yǎng)殖池中的亞硝酸鹽和硫化氫等有害物質(zhì)減少，施用芽孢桿菌的池塘化學(xué)含氧量(COD)值每次測量都低于未施用芽孢桿菌的池塘，且從施用前的9.5下降到8.2(施用10d)，總堿度(ALK)降低，pH也穩(wěn)定在適宜對蝦生長的水平。
3.2作為飼料添加劑提高水產(chǎn)動物的生長性能
芽孢桿菌添加于飼料中可改善動物的生長性能、增強(qiáng)免疫功能、調(diào)節(jié)腸道菌群及保護(hù)腸道黏膜組織形態(tài)等作用。這里重點闡述對動物生長性能的改善作用，主要在以下兩方面發(fā)揮作用。一是產(chǎn)生多種水解酶，可促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)在動物體內(nèi)的消化利用。芽孢桿菌在生長繁殖過程中可產(chǎn)生蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等消化酶，促進(jìn)相應(yīng)營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用。丁賢等(2004)在凡納濱對蝦、劉小剛等(2002)在異育銀鯽上都驗證了此作用。此外，芽孢桿菌還能分泌非淀粉多糖酶，如果膠酶和葡聚糖酶等，可降解飼料中復(fù)雜糖類。其次是產(chǎn)生營養(yǎng)物質(zhì)直接供動物吸收利用。芽孢桿菌在生長繁殖過程中可產(chǎn)生維生素、氨基酸、有機(jī)酸和促生長因子等多種營養(yǎng)物質(zhì)，參與機(jī)體新陳代謝，直接為機(jī)體提供營養(yǎng)物質(zhì)。與此同時，還可促進(jìn)動物對鈣、磷和鐵的利用，促進(jìn)維生素D的吸收。
4小結(jié)
1.缺乏規(guī)范性管理與在校園內(nèi)學(xué)習(xí)相比，由于實習(xí)基地地域比較分散、學(xué)校與企業(yè)溝通不夠、校內(nèi)指導(dǎo)教師不足和忙于學(xué)校其它教學(xué)任務(wù)等原因，導(dǎo)致學(xué)校對學(xué)生在實習(xí)期間的管理力度明顯薄弱。對距離較遠(yuǎn)的實習(xí)基地，甚至只是簡單地把學(xué)生交給實習(xí)單位，實習(xí)管理和考核均由實習(xí)單位代為完成，沒有真正實現(xiàn)對學(xué)生實習(xí)過程進(jìn)行動態(tài)管理和考核，嚴(yán)重影響了校外生產(chǎn)實習(xí)的質(zhì)量，說明學(xué)校在實習(xí)基地的管理上還沒有形成相對科學(xué)、合理的方法和制度。
2.優(yōu)質(zhì)實習(xí)基地不多由于實習(xí)基地資源比較緊俏，海洋技術(shù)系在與企業(yè)簽訂實習(xí)基地時要求較低，而且水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)學(xué)生大多到水產(chǎn)養(yǎng)殖和育苗企業(yè)進(jìn)行生產(chǎn)實習(xí)，這一類的企業(yè)大多建于沿海灘涂和一些比較偏僻的地方，交通不便，基礎(chǔ)條件比較薄弱，勞動強(qiáng)度大，有時還有加班、夜班的情況，每年都會出現(xiàn)個別學(xué)生因不能適應(yīng)艱苦的環(huán)境而擅自離崗或要求換企業(yè)的情況。
3.經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)降低企業(yè)對實習(xí)的積極性目前大部分水產(chǎn)養(yǎng)殖和飼料生產(chǎn)企業(yè)為股份制企業(yè)和私營企業(yè)，經(jīng)濟(jì)效益是企業(yè)發(fā)展的首要目的。學(xué)生的實習(xí)費(fèi)用逐年增加，而高校一直對每個學(xué)生的實習(xí)經(jīng)費(fèi)投入十分有限，這就增加了企業(yè)的負(fù)擔(dān)，由于學(xué)生不是實習(xí)單位的員工，企業(yè)一般不愿投入過多的經(jīng)費(fèi)，而且水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)成本的不斷增加造成企業(yè)利潤相對減少，這就挫傷了學(xué)校與企業(yè)合作的士氣，影響企業(yè)作為實習(xí)基地的積極性，甚至當(dāng)企業(yè)不能從與高校的合作中得到實惠時，便不愿自找麻煩將其做為實習(xí)基地，更不愿意承擔(dān)長期的實踐教學(xué)任務(wù)，另外，由于近幾年實習(xí)安排不當(dāng)，如實習(xí)時間短、學(xué)生在實習(xí)基地不能安心實習(xí)、工作表現(xiàn)不好等不利因素都直接或間接地給企業(yè)留下了負(fù)面影響，因此，校外實習(xí)經(jīng)常很難得到企業(yè)的認(rèn)同，這極大地限制了校外實習(xí)基地的發(fā)展。
4.實習(xí)內(nèi)容單調(diào)，不能滿足實踐教學(xué)需要由于實習(xí)單位都具有一定的生產(chǎn)任務(wù)，而且考慮到安全問題，以及行業(yè)競爭導(dǎo)致產(chǎn)品配方和生產(chǎn)技術(shù)具有保密性，一些飼料生產(chǎn)企業(yè)不愿讓學(xué)生參與所有的生產(chǎn)，往往只允許進(jìn)行飼料原料或成品飼料品質(zhì)分析，一般水產(chǎn)養(yǎng)殖、育苗企業(yè)也只允許學(xué)生進(jìn)行簡單的飼料投喂、疾病預(yù)防等工作。對于名貴水產(chǎn)品養(yǎng)殖企業(yè)，由于投資風(fēng)險巨大，養(yǎng)殖技術(shù)要求高，實習(xí)學(xué)生常常處于實際生產(chǎn)的，陷于簡單的體力勞動之中，企業(yè)安排學(xué)生工作隨意、實習(xí)崗位與所學(xué)專業(yè)不對口的現(xiàn)象時有發(fā)生。還有的實習(xí)基地還存在著實習(xí)教學(xué)內(nèi)容不穩(wěn)定、養(yǎng)殖場地小、基礎(chǔ)設(shè)施差、實驗過程簡單等問題，因此，大部分學(xué)生不能系統(tǒng)地參與行業(yè)生產(chǎn)并深入了解行業(yè)發(fā)展?fàn)顩r，從中學(xué)到的知識有限，很難達(dá)到理想的實習(xí)效果。
二、加強(qiáng)實習(xí)基地建設(shè)的對策
1.加強(qiáng)校內(nèi)實習(xí)基地的建設(shè)每年實習(xí)期間，實習(xí)指導(dǎo)教師總是東奔西跑聯(lián)系合適的企業(yè)，還要落實食宿等后勤事務(wù)，花費(fèi)了不少精力，另外企業(yè)也因追求經(jīng)濟(jì)效益和產(chǎn)品質(zhì)量感到難于安排。為此一些學(xué)校紛紛組建校內(nèi)實習(xí)基地，校內(nèi)實習(xí)基地較校外實習(xí)基地有無可比擬的優(yōu)越性，如實習(xí)就近就地、相對穩(wěn)定、專業(yè)性強(qiáng)、設(shè)備先進(jìn)、教學(xué)功能齊全、有利教師管理、充分發(fā)揮學(xué)校資源優(yōu)勢等，這對于提高實踐教學(xué)質(zhì)量，節(jié)約實習(xí)費(fèi)用都具有重要意義。但是，目前包括水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)的大部分專業(yè)仍缺乏規(guī)范性的校內(nèi)實習(xí)基地，學(xué)校應(yīng)該加強(qiáng)校內(nèi)實驗基地建設(shè)。校內(nèi)實習(xí)基地建設(shè)是一項系統(tǒng)的綜合性工程，需要按照現(xiàn)代職業(yè)教育人才培養(yǎng)目標(biāo)的要求，結(jié)合水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)特點、生產(chǎn)實際以及科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，統(tǒng)籌兼顧、合理規(guī)劃。
2.加大實習(xí)經(jīng)費(fèi)的投入校外實習(xí)基地是基地所屬企業(yè)和學(xué)校的共同財富，保持學(xué)校和實習(xí)企業(yè)良好的關(guān)系是搞好校外實習(xí)基地的基礎(chǔ)，必須堅持校企雙方互惠互利、共同受益的原則。水產(chǎn)養(yǎng)殖和育苗池塘一般面積大、環(huán)境差、設(shè)備簡陋，產(chǎn)生的經(jīng)濟(jì)效益相對較低，但學(xué)生卻能很好地學(xué)到水產(chǎn)養(yǎng)殖模式、育苗技術(shù)、疾病防治技術(shù)等。因此，為了保證實習(xí)質(zhì)量和實習(xí)的順利開展，學(xué)校不能過分地增加企業(yè)的負(fù)擔(dān)，要重視實習(xí)基地的建設(shè)和發(fā)展，加大對發(fā)展規(guī)模大、專業(yè)對口、距離學(xué)校近、學(xué)生實習(xí)效果好的校外實習(xí)基地經(jīng)費(fèi)投入，以促進(jìn)基礎(chǔ)設(shè)施建設(shè)和提高科技含量，保證企業(yè)在接受學(xué)生實習(xí)的同時能增加收益。另外，政府應(yīng)制定財政補(bǔ)貼、稅收優(yōu)惠等政策鼓勵企業(yè)接收大學(xué)生實習(xí)。企業(yè)只有在獲得較好的經(jīng)濟(jì)效益和適當(dāng)資金補(bǔ)償?shù)那闆r下，才能盡全力建設(shè)好實習(xí)基地，保證實習(xí)基地能夠正常運(yùn)轉(zhuǎn)。
3.加強(qiáng)與大型企業(yè)的科研合作在選擇作為實習(xí)基地時，應(yīng)選擇水產(chǎn)養(yǎng)殖、飼料行業(yè)的龍頭企業(yè)或上市企業(yè)，因為這樣具有一定生產(chǎn)規(guī)模、比較雄厚的經(jīng)濟(jì)和科研實力的企業(yè)，才能與學(xué)校在一定的范圍內(nèi)進(jìn)行全面合作。在科研項目中，高校借助學(xué)校人才優(yōu)勢和企業(yè)發(fā)展方向，共同尋找合適的研究項目，在產(chǎn)學(xué)研上能更好地合作，以幫助企業(yè)解決生產(chǎn)上的技術(shù)難題；高校要適當(dāng)多開展應(yīng)用型研究，將科研成果轉(zhuǎn)讓給企業(yè)，促使企業(yè)技術(shù)改造，提高市場競爭力，學(xué)校還可以為企業(yè)提供一定的知識講座、技術(shù)咨詢、員工培訓(xùn)等［3］，讓企業(yè)感受到實習(xí)基地的建立能夠給企業(yè)帶來新技術(shù)和新信息，能夠提高企業(yè)技術(shù)力量和管理水平，給企業(yè)帶來效益。只有這樣企業(yè)才能歡迎學(xué)生實習(xí)，并提供食宿和生活補(bǔ)助，學(xué)生通過接觸社會和生產(chǎn)實際，才能增強(qiáng)創(chuàng)業(yè)意識和創(chuàng)新精神，提高實際動手能力和綜合素質(zhì)［4］。同時，教師通過到基地工作，才能了解企業(yè)和農(nóng)民急需，科研立項才能更符合生產(chǎn)實際，貼近生產(chǎn)需要。學(xué)校還可以經(jīng)常聘請經(jīng)驗豐富的企業(yè)技術(shù)人員到學(xué)校進(jìn)行講學(xué)，并定期舉辦技術(shù)、學(xué)術(shù)交流活動，使雙方能夠優(yōu)勢互補(bǔ)、互惠共贏。
4.加強(qiáng)指導(dǎo)教師隊伍建設(shè)實習(xí)帶隊教師是提高實習(xí)質(zhì)量的重要保證，由于水產(chǎn)養(yǎng)殖工作量大，需要充沛精力和體力作保障，另一方面為了培養(yǎng)青年專業(yè)教師，學(xué)校一般提倡年富力強(qiáng)的教師作為實習(xí)指導(dǎo)老師，但派到實習(xí)基地的指導(dǎo)教師在實際生產(chǎn)上往往有一定差距，對水產(chǎn)方面的生產(chǎn)經(jīng)驗不足，難以完成實習(xí)指導(dǎo)任務(wù)［5］。因此，學(xué)校應(yīng)對青年教師的生產(chǎn)技術(shù)和生產(chǎn)管理進(jìn)行培訓(xùn)，要建設(shè)一支結(jié)構(gòu)合理、素質(zhì)優(yōu)良、教學(xué)和科研能力較強(qiáng)的“雙師型”專業(yè)教師隊伍，并定期選派到企業(yè)掛職鍛煉，通過與技術(shù)人員、工人師傅接觸交流，或參與企業(yè)的科學(xué)研究、科技推廣和生產(chǎn)管理等各個環(huán)節(jié)，以提高教師的實踐能力和適應(yīng)應(yīng)用技術(shù)發(fā)展前沿的能力，使指導(dǎo)教師既能從深層面上理解和掌握所學(xué)的專業(yè)知識，勝任應(yīng)用型人才的培養(yǎng)，又能真正地做到理論與實踐的結(jié)合，提高其專業(yè)研究能力［6］。
5.加強(qiáng)校外實習(xí)基地的管理只有建立良好的校外實習(xí)基地運(yùn)行機(jī)制，才能保證校外實習(xí)基地持續(xù)、健康、良性的可持續(xù)發(fā)展。學(xué)校要根據(jù)培養(yǎng)目標(biāo)從基地實際情況出發(fā)，與基地所屬企業(yè)共同制定實習(xí)內(nèi)容、規(guī)章制度和考核評價體系，明確學(xué)校、企業(yè)和學(xué)生的責(zé)任與權(quán)利。只有在實習(xí)過程中嚴(yán)格執(zhí)行實踐教學(xué)的各項規(guī)章制度，對學(xué)生的實習(xí)效果進(jìn)行科學(xué)、合理的評價，對實習(xí)指導(dǎo)教師進(jìn)行考核，才能提高學(xué)生、教師的重視程度，才能保障實習(xí)基地資源的高效利用，保證實踐教學(xué)的質(zhì)量與效果。
三、結(jié)語
關(guān)鍵詞：DS18B20，1-wire總線，水產(chǎn)養(yǎng)殖溫控系統(tǒng)，STM32F103CB
0 引言
我國漁業(yè)生產(chǎn)正處在從粗放型、分散化向精準(zhǔn)型、集約化發(fā)展，從資源消耗型、數(shù)量型向資源節(jié)約型、質(zhì)量型現(xiàn)代化漁業(yè)跨越的重要時期。水產(chǎn)養(yǎng)殖溫控系統(tǒng)可以發(fā)揮重要作用：可以實時監(jiān)測各個養(yǎng)殖場生產(chǎn)情況，促使養(yǎng)殖場嚴(yán)格按照規(guī)范進(jìn)行生產(chǎn)，從而保證產(chǎn)品質(zhì)量；及時發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖過程中的環(huán)境和疫病等隱患，提高養(yǎng)殖存活率。其中溫度的監(jiān)測是很重要的一個指標(biāo)。故此，我們設(shè)計了這套性價比高、使用方便、易于安裝和維護(hù)的溫控系統(tǒng)。
1 系統(tǒng)概述
本溫控系統(tǒng)是針對鱔魚幼苗培育而研發(fā)的一套以溫度控制為主兼顧其他指標(biāo)的監(jiān)控系統(tǒng)。其系統(tǒng)構(gòu)成如圖1所示。本系統(tǒng)由32位微控制器模塊、溫度采集模塊、光照采集模塊、控制執(zhí)行模塊、加熱模塊等組成。其工作過程為:多個數(shù)字溫度傳感器DS18B20將感應(yīng)到的溫度模擬信號轉(zhuǎn)換為數(shù)字電信號后，輸入到溫度檢測模塊，由溫度檢測模塊傳輸給微控制器模塊，進(jìn)行數(shù)據(jù)的處理，經(jīng)過處理好的數(shù)據(jù)一方面通過232通訊傳輸給上位機(jī)實時監(jiān)控顯示；另一方面在進(jìn)行模糊PID參數(shù)的自調(diào)整，調(diào)整好的參數(shù)輸出到控制執(zhí)行模塊和加熱模塊，控制執(zhí)行模塊接受到命令以后執(zhí)行卷簾電機(jī)的開度、冷氣機(jī)的開關(guān)、熱水爐的開關(guān)及變頻器的調(diào)節(jié)等。
圖1 系統(tǒng)框圖
2 硬件部分
2.1 DS18B20簡介
DS18B20是最新型的數(shù)字化溫度傳感器，是單總線器件家族中的一員。它使用一種片內(nèi)專有的溫度測量技術(shù)測溫。利用高低溫度系數(shù)振蕩器記錄由當(dāng)時環(huán)境溫度所確定的計數(shù)值,以此確定當(dāng)時當(dāng)?shù)氐臏囟?。?nèi)部主要有測溫電路，1-Wire接口電路科技小論文，存儲電路及CRC校驗電路。特點如下：
(1) 1-wire數(shù)字接口；
(2) 專有的64位ROM序列號。含有8位家族號(28H),48位獨(dú)立序列號，8位CRC校驗碼，保證串行數(shù)據(jù)傳輸?shù)目煽?，出錯可檢驗；
(3) -10℃至+85℃范圍內(nèi)保證測溫精度：±0.5℃；
(4) -55℃至+125℃的寬工作范圍；
(5) +3.0V至+5.5V的寬電源范圍；
(6) 可根據(jù)實際情況采用本地供電或通過I/O線供電；
(7) 用戶可選的9至12位分辨率,可編程選擇；
(8) 2字節(jié)EERROM,存儲上下限報警溫度設(shè)定值；
(9) 封裝形式有TO-92，150milSO和倒裝芯片(±2.0℃精度)；
(10) 體積小，價格低，使用靈活；
(11) 無需任何外圍硬件；
(12) 16位二進(jìn)制溫度數(shù)據(jù)格式(兩個字節(jié))，負(fù)溫度采用補(bǔ)碼表示。這些特點使系統(tǒng)設(shè)計更靈活、方便，適合構(gòu)建大型的溫度測量系統(tǒng)。單總線的數(shù)字方式傳輸也大大提高了系統(tǒng)的抗干擾能力。主機(jī)與DS18B20交換數(shù)據(jù)主要靠CPU按照1-wire單總線協(xié)議在單總線上產(chǎn)生復(fù)位時序和讀寫時序來實現(xiàn)。其中包含復(fù)位脈沖、響應(yīng)脈沖，寫1寫0讀1、讀0時序。只有響應(yīng)脈沖由DS18B20發(fā)出，其余都由主機(jī)(程序)發(fā)出。時序要求具體介紹如下：
①復(fù)位時序：主機(jī)發(fā)出一個寬度為480~960μs的負(fù)脈沖之后，再發(fā)出15~60μs的正脈沖，DS18B20則會發(fā)出一個60~240μs的響應(yīng)負(fù)脈沖，復(fù)位時序結(jié)束。
②寫時間片：即寫一位二進(jìn)制信息，周期至少為61μs，且含至少1μs的恢復(fù)時間。主機(jī)啟動寫時序之后的15~60μs之間，DS18B20自動采樣數(shù)據(jù)線，低電平為0，高電平為1。主機(jī)寫0時，持續(xù)低電平60~120μs之間。寫1時,要在啟動后15μs之內(nèi)使數(shù)據(jù)線變?yōu)楦唠娖健?/p>
③讀時間片:即讀一位二進(jìn)制信息，周期及恢復(fù)時間要求與寫時間片相同。主機(jī)啟動讀時序之后,至少保持1μs低電平，然后在接近啟動后15μs之前讀入數(shù)據(jù)。低電平為0，高電平為1。
2.2 STM32F103CB簡介
該系統(tǒng)芯片采用ST公司的32位微處理芯片STM32F103CB，該芯片采用Cortex-M3內(nèi)核的作為中心控制單元，具有32位硬件除法和單周期乘法器等一系列先進(jìn)的體系結(jié)構(gòu)；可以有效地實現(xiàn)一些數(shù)字信號處理的算法(如FFT、DTMF等)，有多達(dá)128KB的閃存，4個通用定時器模塊，32位定時器模式科技小論文，34個中斷，具有8個優(yōu)先級，2個SSI同步串行接口模塊等豐富的資源。
STM32F103CB微處理器模塊是整個溫控系統(tǒng)的核心模塊，主要功能是實時處理數(shù)字溫度傳感器DS18B20采集到的溫度信息，并將得到的溫度信息值與模糊PID控制器設(shè)定控制輸出曲線進(jìn)行實時對比得出需要輸出的控制信號量;產(chǎn)生輸出控制PWM波信號和通過232通訊傳輸給上位機(jī)實時監(jiān)控顯示。
2.3 硬件電路圖
圖2 DS18B20溫度采集電路圖
圖3 232通訊電路圖
3 軟件部分
3.1 溫度采集子任務(wù)
圖4 DS18B20數(shù)據(jù)采集流程圖
3.2 模糊PID控制子任務(wù)
圖5 模糊PID算法流程圖
3.3 上位機(jī)界面
本上位機(jī)界面采用VB編寫，方便實用，操作簡單。
圖6 上位機(jī)控制界面
4 結(jié)束語
本系統(tǒng)將模糊PID溫度自動控制技術(shù)應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中，以養(yǎng)殖場內(nèi)各種水溫為主要被控對象，建立了以模糊PID控制理論為基礎(chǔ)的溫度自動控制系統(tǒng)，整個系統(tǒng)可以有效地降低消耗，提高生產(chǎn)效率，符合國家提出的“節(jié)能減排”要求，符合國家經(jīng)濟(jì)發(fā)展政策，具有十分廣闊的市場應(yīng)用前景。
圖7 調(diào)試現(xiàn)場一
圖7 調(diào)試現(xiàn)場二
通過現(xiàn)場3個月的實際應(yīng)用測試，目前運(yùn)行良好，達(dá)到了當(dāng)初的設(shè)計目的。
參考文獻(xiàn)
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線粒體DNA非編碼區(qū)由兩個tRNA基因分離，D-loop區(qū)域就處在這個非編碼區(qū)中[2]。在線粒體DNA中，D-loop區(qū)是重鏈和輕鏈的復(fù)制起點，也稱之為“控制區(qū)ControlRegion”，其進(jìn)化壓力較小，是線粒體DNA基因組序列和長度變異最大的區(qū)域，Horai等[3]發(fā)現(xiàn)該區(qū)域的基因變化速度比細(xì)胞核DNA和其他細(xì)胞器的基因快5倍，同時也是進(jìn)化最快的部分。因此，選擇D-loop區(qū)作為鑒定種群遺傳狀況的分子標(biāo)記直接有效。利用D-loop的序列在群體遺傳學(xué)上進(jìn)行分析的工作在20世紀(jì)70年代就已經(jīng)展開了，那時候僅僅用于分析區(qū)域內(nèi)種間的親緣關(guān)系?，F(xiàn)今，D-loop區(qū)已經(jīng)廣泛被用作非常高效的工具來推斷不同區(qū)域內(nèi)種間或種內(nèi)的親緣關(guān)系和遺傳狀況。D-loop區(qū)中仍然細(xì)分為3個部分，中央保守區(qū)、終止序列區(qū)和保守序列區(qū)。其中終止序列區(qū)包含了線粒體DNA終止復(fù)制的相關(guān)序列，是變異最大的部分[4]，最具研究和分析價值。在進(jìn)行數(shù)據(jù)結(jié)果分析時，由D-loop序列分析得到的單倍型多樣性指數(shù)和核苷酸多樣性是兩個評價群體遺傳資源或者群遺傳多樣性的重要指標(biāo)。
1.1野生群體遺傳多樣性分析
1.1.1D-loop部分序列分析D-loop序列分析中，由于并不是整個D-loop序列都發(fā)生堿基的插入或者替換，可以采取對保守序列區(qū)或者終止序列區(qū)的部分區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增。由于這兩個部分的進(jìn)化比中央保守區(qū)迅速得多，只對這一區(qū)段的序列進(jìn)行分析也能代表物種的遺傳多樣性和進(jìn)化過程。張仁意等[5]對青海4個不同湖水采集的155尾裸鯉（Gymnocyprisprzewalskii）個體的線粒體DNA的D-loop區(qū)中部分序列進(jìn)行擴(kuò)增，得到754bp的序列長度，分析發(fā)現(xiàn)155個樣本中有34個單倍型，但4個群體中可魯克湖群體的單倍型多樣性和核苷酸多樣性遠(yuǎn)低于其他種群；進(jìn)一步的遺傳分化系數(shù)的分析表明，該地區(qū)已經(jīng)產(chǎn)生一定的遺傳分化，但由于地理隔離的原因，系統(tǒng)發(fā)育樹結(jié)果還沒有發(fā)展出明顯的單枝，加之該區(qū)域群體的遺傳多樣性偏低，需要進(jìn)行重點保護(hù)。
鄭真真等[6]對全球大青鯊（Prionaceglauca）進(jìn)行了D-loop區(qū)中694bp擴(kuò)增分析，采集了來自中東太平洋、中西太平洋、中東大西洋、西南大西洋和印度洋5個海域的165尾個體，分析發(fā)現(xiàn)145個單倍型，變異程度非常大。進(jìn)一步分析后發(fā)現(xiàn)5個區(qū)域的大青鯊種群的單倍型和核苷酸都處于較高水平，種質(zhì)資源較好；但是遺傳分化指數(shù)顯示5個區(qū)域存在強(qiáng)烈的基因交流，種群遺傳分化水平較低。鄒芝英等[7]采集了8尾長鰭鯉（Cyprinuscarpiovar.longfin），擴(kuò)增得到600bp的部分序列，找到了與終止區(qū)域相關(guān)的6個特征序列；對這些特定的區(qū)域分析得到6個單倍型，13個變異位點，顯示了較好的種質(zhì)資源狀況，核苷酸多樣性數(shù)值與其他魚類接近，遺傳狀況中等，由于該物種稀有且僅存在偏遠(yuǎn)地區(qū)，保護(hù)珍惜水產(chǎn)動物資源已經(jīng)迫在眉睫。向燕等[8]為了了解3種鱘魚：達(dá)氏鱘（Acipenserdabryanus）、中華鱘（A.sinensi）和史氏鱘（A.schrencki）親魚的遺傳狀況和遺傳背景，對線粒體D-loop區(qū)部分序列進(jìn)行分析，擴(kuò)增得到400bp的序列，49尾親魚個體一共得到僅18個單倍型，并且對于單倍型系統(tǒng)發(fā)育樹分析后，發(fā)現(xiàn)集中在6個單倍型中，說明這些群體很有可能來自同一母親；不過各單倍型遺傳距離較遠(yuǎn)，說明父本來自不同的個體；其結(jié)果提示，在生產(chǎn)中仍要采用不同單倍型進(jìn)行人工繁育，以避免近親而導(dǎo)致種質(zhì)退化。
Kumazawa等[9]研究發(fā)現(xiàn)，D-loop的5＇端和3＇端有串聯(lián)重復(fù)序列，這段的變異速率較快。Abinash等[10]在北美不同區(qū)域采集淡水扁頭鯰（Pylodictisolivaris），對35bp的串聯(lián)重復(fù)區(qū)進(jìn)行分析檢測，從美國35個水系采集了330尾樣本，分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在東南墨西哥灣的70%樣本出現(xiàn)串聯(lián)重復(fù)的變異，而采自密西西比河95％的樣本和墨西哥灣西南沿岸的扁頭鯰沒有出現(xiàn)這個區(qū)域的變異；系統(tǒng)發(fā)育的計算結(jié)果表明，在70萬年和205萬年左右出現(xiàn)群體分流；從地理位置上看，密西西比河的支流進(jìn)入墨西哥灣西南沿岸流域，而東南墨西哥灣為另一條流域；該結(jié)果表明種群的遺傳結(jié)構(gòu)受到地域特殊性的影響。D-loop區(qū)部分序列的結(jié)果分析能滿足一定程度的遺傳多樣性和遺傳狀況分析，可以得到可靠的結(jié)果數(shù)據(jù)幫助人們進(jìn)行資源保護(hù)和簡單的育種工作。隨著科技進(jìn)步和測序水平的改善，進(jìn)行全序列的測序漸漸進(jìn)入研究者的視野，全長序列將獲得更加完整和正確的結(jié)果。
1.1.2D-loop全序列分析D-loop的多態(tài)性一種是來源于堿基的突變、插入和替換形成的不同單倍型，不僅種間有差異，種內(nèi)個體間也存在差異，只是重復(fù)的差異小于種間的差異。而且在個體中D-loop一旦發(fā)生差異，線粒體DNA會穩(wěn)定地將這種差異遺傳下去，這種差異在個體間表現(xiàn)為線粒體DNA分子的長度變異，因此對D-loop全長進(jìn)行分析研究更能體現(xiàn)整體的變異程度。肖明松等[11]在淮河淮濱段、鳳臺段、蚌埠段、洪澤湖段采集84尾野生烏鱧（Ophicephalusargus）進(jìn)行種群資源的研究，分析發(fā)現(xiàn)33個單倍型，檢測了單倍型多樣性（h）、核苷酸多樣性（Pi）、遺傳分化指數(shù)（Fst）、遺傳距離以及中性檢驗、錯配分析和NJ樹，發(fā)現(xiàn)其h和Pi較高，表明種群平均多態(tài)性相對較好；但在遺傳距離的分析中發(fā)現(xiàn)所有群體的差異都較小，這可能是由于在淮河流域中不同支流的種流程度較高造成的，所以變異發(fā)生在種內(nèi)，而種群之間的分化較少。董志國等[12]對大連、東營、連云港、舟山、湛江和漳州6個地區(qū)的野生三疣梭子蟹（Portunustritubercatus）進(jìn)行D-loop全基因組區(qū)的遺傳多樣性及群體遺傳結(jié)構(gòu)的分析，選擇單倍型多樣性和核苷酸多樣性作為重要指標(biāo)，并加入了群體遺傳分化指數(shù)的分析，進(jìn)行Tajima’sD中性檢驗和單倍型間的分子變異分析，發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)梭子蟹的遺傳多樣性很高，產(chǎn)生一定的遺傳分化；不過在系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析中，地理距離對遺傳距離沒有顯著的關(guān)系，原因仍需要進(jìn)一步研究。趙良杰等[13]在千島湖汾口、富文、臨岐3個大眼華鳊（Sinibramamacrops）主要繁殖區(qū)域采集了115尾個體，對樣品進(jìn)行了形態(tài)學(xué)和D-loop序列測定后，分析形態(tài)主成分和各個基因遺傳學(xué)分析指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)千島湖各地的大眼華鳊之間有豐富的基因交流，并沒有形成容易滅絕的小種群，表明各個地理群體仍然有豐富的遺傳多樣性，面對一定的災(zāi)害時有一定的彈性，不過這樣的良好狀況仍然需要政府和漁民對該區(qū)域的種質(zhì)資源進(jìn)行保護(hù)。高志遠(yuǎn)等[14]對海南松濤水庫南豐鎮(zhèn)、番加鄉(xiāng)、白沙群體的長臀鮠（Cranoglanisbouderius）的D-loop序列全場進(jìn)行分析，44尾個體中發(fā)現(xiàn)11個單倍型，但在分析中發(fā)現(xiàn)單倍型較高，而核苷酸多樣性較低，認(rèn)為是由于海南島偏僻的地理位置難與大陸長臀鮠進(jìn)行基因交流，推斷在歷史中可能出現(xiàn)過嚴(yán)重的瓶頸效應(yīng)；中性檢測也表明沒有任何整體或局部的種群擴(kuò)張，數(shù)據(jù)皆表明該地域長臀鮠正處在較危險的境地，需要進(jìn)行種群的保護(hù)措施。
1.2養(yǎng)殖群體遺傳多樣性分析目前，國內(nèi)對水產(chǎn)動物養(yǎng)殖過程中出現(xiàn)的生長不良與病害頻繁大多歸結(jié)于飼料與環(huán)境的問題。誠然，營養(yǎng)和免疫是養(yǎng)殖的關(guān)鍵，但是由于人工育種和繁育雜交造成的種質(zhì)資源下降也是重要因素之一。養(yǎng)殖戶往往在育種過程中，沒有考慮到育種群體的遺傳狀況，導(dǎo)致近親雜交，子代產(chǎn)生各種問題。徐鋼春等[15]對灌江納苗養(yǎng)殖刀鱭（Coilianasus）的子三代品種與在淡水生活環(huán)境下湖鱭（C.nasustaihuensis）兩個群體的遺傳多樣性進(jìn)行了比較和分析，進(jìn)行單倍型和核苷酸分析后，發(fā)現(xiàn)養(yǎng)殖刀鱭的遺傳多樣性要優(yōu)于湖鱭，這可能是由于刀鱭僅是子三代，還未經(jīng)歷大量的人工繁殖和育種，保留了較好的遺傳狀況；而湖鱭由于其陸封型的特點，導(dǎo)致其種質(zhì)資源漸漸下降，需要進(jìn)行放流等活動保證種質(zhì)資源。姚茜等[16]對來自浙江湖州某公司的養(yǎng)殖群體、緬甸引進(jìn)的群體和兩者雜交的“南太湖1號”群體的羅氏沼蝦（Macrobrachiumrosenbergii）的D-loop區(qū)進(jìn)行分析，共16尾群體分析得到14個單倍型，結(jié)果表明緬甸引進(jìn)的群體核苷酸多樣性最高，浙江湖州人工養(yǎng)殖群體的多樣性最低，說明人工育種對遺傳多樣性有較大的影響。通過遺傳距離和遺傳分化指數(shù)分析發(fā)現(xiàn)，雜交群體更加偏向本地種群。在今后的育種工作中，可在雜交代中選取優(yōu)秀性狀的沼蝦，與緬甸種群雜交，以獲得更優(yōu)秀的品種，為今后的人工繁育打下基礎(chǔ)。李勝杰等[17]將珠江水產(chǎn)研究所養(yǎng)殖品種大口黑鱸（Micropterussalmoides）與北方和佛羅里達(dá)兩個野生群體進(jìn)行D-loop區(qū)的遺傳分析，在23尾采集的樣品中，5尾個體含有兩種單倍型，北方11尾個體發(fā)現(xiàn)9種單倍型，而佛羅里達(dá)僅有1種單倍型。在遺傳距離分析上發(fā)現(xiàn)，珠江水產(chǎn)研究所的養(yǎng)殖群體與北方群體更加接近。對于單倍型多樣性和核苷酸多樣性分析，結(jié)果表明養(yǎng)殖群體與國外種群相比，其遺傳多樣性處于較低水平，需要開展種質(zhì)的保護(hù)工作，應(yīng)引入國外品種進(jìn)行雜交，改善國內(nèi)養(yǎng)殖群體的遺傳結(jié)構(gòu)，提高遺傳多樣性，豐富大口黑鱸的種質(zhì)資源。
1.3親緣與起源分析D-loop區(qū)串聯(lián)重復(fù)的現(xiàn)象雖然豐富，但是不同動物的重復(fù)位置不一致，重復(fù)的序列和重復(fù)的單元也不一致，所以相近物種之間對比分析有助于明確不同物種的關(guān)系。郝君等[18]對烏克蘭鱗鯉（Cyprinuscarpio）、鯽（Carassisauratus）、鰱（Hypophthalmichthysmolitrix）、鳙（Aristichthysnobilis）、草魚（Ctenopharyngodonidellus）和烏蘇里擬鲿（Pseudobagrusussuriensis）6種不同魚的線粒體D-loop區(qū)進(jìn)行測序，分析了種內(nèi)、種間遺傳結(jié)構(gòu)差異，發(fā)現(xiàn)作為分子標(biāo)記對系統(tǒng)分化效果的差異，6種不同魚的堿基含量、堿基差異、遺傳距離和系統(tǒng)發(fā)育都有顯著的差異，構(gòu)建的D-loop序列的NJ系統(tǒng)樹展示了6種魚的分類地位，肯定了D-loop區(qū)比鄰近區(qū)段的tRNA和12sRNA在魚類識別、分類、種類鑒定和遺傳多樣性分析上更加可靠。侯新遠(yuǎn)等[19]對5種蝦虎魚類進(jìn)行了系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系的研究，分析了河川沙塘鱧（Odontobutispotamophila）、鴨綠沙塘鱧（O.yaluensis）、中華沙塘鱧（O.sinensis）、葛氏鱸塘鱧（Perccottusglenii）及尖頭塘鱧（Eleotrisoxycephala）這6種蝦虎魚類同源長度約為830bp的D-loop序列，通過系統(tǒng)發(fā)育樹和遺傳距離分析，得到6種魚類的親緣關(guān)系即河川沙塘鱧、鴨綠沙塘鱧、中華沙塘鱧、平頭沙塘鱧聚為一支，尖頭塘鱧、葛氏鱸塘鱧和褐塘鱧等聚為另一支，為魚類資源的分類和利用提供了基礎(chǔ)。馬波等[20]在額爾齊斯河采集了兩種類型的銀鯽（C.auratusgibelio），對幾種鯽魚的可量性狀和D-loop區(qū)進(jìn)行分析，得到了優(yōu)勢種群的生長性狀，確定了它們的遺傳學(xué)特征和分類學(xué)地位，同時通過D-loop區(qū)的單倍型共享率研究了兩種鯽的起源和遺傳特征，這些結(jié)果對我國將來進(jìn)行銀鯽育種有很大幫助。Klaus等[21]利用D-loop序列對歐洲鯉魚（C.carpio）137的起源進(jìn)行研究。在此之前對于歐洲鯉魚也有過很多關(guān)于起源的研究：Zhou等[22]發(fā)現(xiàn)一些歐洲養(yǎng)殖的鯉魚起源可能在德國和歐洲，而俄羅斯主要養(yǎng)殖的鯉魚起源在亞洲。Zhou等[23]在德國鏡鯉和伏爾加河的野生鯽魚利用D-loop區(qū)全序列獲得獨(dú)特的3種單倍型；而Mabuchi等[24]在日本鯉魚中發(fā)現(xiàn)有兩個D-loop區(qū)單倍型與Zhou等報道的歐洲發(fā)現(xiàn)的單倍型非常相似。Klaus等[21]的研究結(jié)果指出歐洲和中亞所有的鯉魚品種有一個共同的祖先，而且有可能是在后冰河時期傳播到中亞或者歐洲。對于這種現(xiàn)象，可能是由于在育種過程中，沒有進(jìn)行規(guī)范的養(yǎng)殖記錄，導(dǎo)致各種群出現(xiàn)雜交現(xiàn)象。而且，養(yǎng)殖戶挑選具有優(yōu)勢性狀的品種進(jìn)行，容易導(dǎo)致其他稀有單倍型的消失，從而使得種質(zhì)資源慢慢下降。
1.4個體內(nèi)異質(zhì)性分析同一個體內(nèi)存在多種重復(fù)序列數(shù)目不同從而表現(xiàn)為異質(zhì)。高祥剛等[25]采用克隆技術(shù)，在我國海域隨機(jī)采集了3頭斑海豹（Phocalargha），每尾個體任選14個克隆菌，對它們的線粒體DNAD-loop區(qū)的終止序列區(qū)進(jìn)行擴(kuò)增測序，發(fā)現(xiàn)其個體內(nèi)存在多種不同的串聯(lián)重復(fù)單位，即存在異質(zhì)現(xiàn)象，說明我國的斑海豹種質(zhì)資源保護(hù)較好，進(jìn)化狀態(tài)比較積極。張四明等[26]在野生的中華鱘種群種間和個體體內(nèi)檢測線粒體DNA的長度變異情況，發(fā)現(xiàn)中華鱘有較多個體的異質(zhì)性，表現(xiàn)出良好的遺傳多樣性。由此可見，個體的異質(zhì)存在是導(dǎo)致線粒體DNA中控制區(qū)D-loop長度變化的主要原因，而個體的線粒體DNA長度異質(zhì)性是直接推動動物物種遺傳多樣性的重要途徑。綜上所述，可以發(fā)現(xiàn)線粒體D-loop區(qū)的序列分析已經(jīng)在水產(chǎn)行業(yè)取得大量進(jìn)展，D-loop區(qū)基因的插入、突變和替換都是影響多樣性的關(guān)鍵，而個體內(nèi)的異質(zhì)和串聯(lián)重復(fù)的高頻率變化不僅存在于水產(chǎn)動物個體中，也存在于種群內(nèi)，甚至在不同物種之間都對野生水產(chǎn)動物的起源、親緣關(guān)系、遺傳多樣性、遺傳結(jié)構(gòu)和動物進(jìn)化程度起著重要的作用。在養(yǎng)殖群體中，D-loop區(qū)的分析正在漸漸起到重要的作用，若結(jié)合微衛(wèi)星、RFLP等其他分子標(biāo)記技術(shù)，將來對人工育種和對親魚、親蝦的選育工作有重大意義。
2細(xì)胞色素b序列（cytb）
線粒體DNA中編碼蛋白質(zhì)的基因有還原型輔酶I的亞基、ATP合成酶的亞基、細(xì)胞色素c氧化酶的3個亞基和細(xì)胞色素b[27]。Zardoya等[28]研究認(rèn)為，cytb的進(jìn)化速度適中，適合進(jìn)行種內(nèi)和種間的遺傳分析?，F(xiàn)今利用cytb序列多數(shù)用于種內(nèi)和種間的遺傳分化分析、遺傳圖譜建立和遺傳多樣性調(diào)查，并輔以其他標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行組合分析。王曉梅等[29]獲取中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)cytb序列的PCR產(chǎn)物后，利用DGGE技術(shù)分析了溫州、儀征、江都、南京、盤錦和合浦地區(qū)的中華絨螯蟹的遺傳多樣性，并與合浦絨螯蟹(E.japonicahepuensis)對比，發(fā)現(xiàn)中華絨螯蟹與合浦絨螯蟹遺傳距離較大，在親緣關(guān)系上具有顯著的差異，但是仍有部分遺傳標(biāo)記相同，說明存在一定的基因交流。
黃小彧等[30]利用cytb序列檢測了長江支流貴定與干流合江和宜都的中華倒刺鲃(Spinibarbussinensis)群體的遺傳多樣性，分析群體的遺傳距離，結(jié)合地理因素分析了該物種的種質(zhì)資源現(xiàn)狀，發(fā)現(xiàn)合江的遺傳多樣性最好，而支流群體與干流群體的遺傳分化較大，地理隔離使同一物種的基因交流程度降低。夏月恒等[31]利用cytb序列對中國近海3個地區(qū)的鮸魚（Miichthysmiiuy）的遺傳多樣性進(jìn)行分析，通過對地理環(huán)境和歷史因素的解釋，認(rèn)為中國鮸魚基因型的單倍型多樣性高和核苷酸多樣性低可能是因為種群在某個時期突然擴(kuò)張，使單倍型突變大量產(chǎn)生，但這段時間對于提高核苷酸多樣性時間不足，所以產(chǎn)生了如此差別；且Fst結(jié)果極低，說明該地區(qū)遺傳分化程度很低，加上不同地理的單倍型網(wǎng)絡(luò)圖交錯呈現(xiàn)，有可能是因為種群由于擴(kuò)張之后還未達(dá)到平衡，需要對該地區(qū)進(jìn)行保護(hù)。鐘立強(qiáng)等[32]調(diào)查了長江中下游5個湖泊的黃顙魚，利用cytb序列分析了不同地區(qū)遺傳多樣性和遺傳分化的程度，60尾個體檢測出37個單倍型，F(xiàn)st分析顯示這5個種群的變異大部分都來自群體內(nèi)，說明各個種群間有一定的基因交流，系統(tǒng)樹顯示它們沒有分化成譜系。司從利等[33]從長江貴定和樂山兩個群體的泉水魚cytb序列分析其遺傳狀況、結(jié)構(gòu)和多樣性程度，發(fā)現(xiàn)這兩個群體由于三峽大壩的地理因素，已明顯受到嚴(yán)重的影響，出現(xiàn)高度的遺傳分化，建議對該物種進(jìn)行分區(qū)保護(hù)，提高遺傳多樣性，豐富種質(zhì)資源。
司從利等[34]在廣東、廣西等地基于cytb序列分析了華南居氏銀魚（Salanxcuvieri）的遺傳現(xiàn)狀，從鄰接樹上可發(fā)現(xiàn)有一定的分支，認(rèn)為地理因素正在逐漸影響遺傳結(jié)構(gòu)，推測瓊州海峽的地理位置可能影響廣東、廣西種群間的遺傳交流；中性檢測結(jié)果表明在更新世晚期發(fā)生擴(kuò)增，地球當(dāng)時的氣候影響了該種群的遺傳多樣性；根據(jù)現(xiàn)狀，建議分地區(qū)對該種群進(jìn)行人為保護(hù)，避免出現(xiàn)種質(zhì)退化。李偉文等[35]兩年中在7個遠(yuǎn)洋捕撈點采集了黃鰭金槍魚（Thunnusalbacares），擴(kuò)增了cytb部分序列得到663bp，108尾個體僅有24個單倍型，且單倍型多樣性和核苷酸多樣性都處于較低水平，群體的遺傳多樣性較差；Fst分析得到變異大多發(fā)生在群體內(nèi)部，表明其遺傳分化程度較低，并且基因交流非常強(qiáng)烈，種質(zhì)資源正在衰退，這與人類破壞環(huán)境和大面積捕殺有密切關(guān)系。謝楠等[36]利用cytb對魴屬（Megalobrama）4種魚類及長春鳊（Parabramispekinensis）進(jìn)行了系統(tǒng)分類。但在結(jié)果分析過程中僅靠cytb的信息難以準(zhǔn)確將不同品種進(jìn)行區(qū)分，仍需要配合其他標(biāo)記進(jìn)一步研究。
3其他標(biāo)記與組合分析
16SrRNA序列、12SrRNA序列和COI序列在線粒體基因組中變異速度較慢，保守性較高，因此很難由其單獨(dú)作為驗證工具來進(jìn)行遺傳分析，往往需要結(jié)合其他的基因片段，才能同時作為鑒定種內(nèi)親緣關(guān)系和物種遺傳多樣性程度的工具。劉萍等[37]選取了山東青島中華虎頭蟹（Orithyiasinica）野生群體的16SrRNA和COI基因片段研究其遺傳多樣性，但是發(fā)現(xiàn)16SrRNA變異程度較小，效果不佳；在遺傳距離和系統(tǒng)進(jìn)化研究中，兩種技術(shù)檢測了不同蟹之間的親緣關(guān)系以及它們的進(jìn)化分化時間，利用NJ系統(tǒng)進(jìn)化樹發(fā)現(xiàn)中華虎頭蟹與梭子蟹類的親緣關(guān)系最近，并采用“分子鐘”對4個蟹類的分化時間進(jìn)行計算。吳玲等[38]對沿海6個群體的白氏文昌魚（Branchiostomabelcheri）和日本文昌魚（B.japonicum）分別進(jìn)行COI和16SrRNA序列的研究，發(fā)現(xiàn)兩種魚種內(nèi)遺傳多樣性較高，但還沒有明顯的遺傳分化；其中茂名群體和威海群體具有最高的核苷酸多樣性，很有可能為這兩類魚的祖先。
翁朝紅等[39]對近江蟶（Sinonovacularivularis）、縊蟶（S.constricta）、小刀蟶（Cultellusattenuatus）、尖刀蟶（C.scalprum）和大竹蟶（Solengrandis）的COI和16SrRNA部分序列進(jìn)行測序和分析，在進(jìn)行遺傳距離和系統(tǒng)演化分析后，結(jié)果表明近江蟶已進(jìn)化至獨(dú)立為一個種，并且通過聚類分析推斷近江蟶應(yīng)歸屬于竹蟶超科，解決了這幾種蟶分類歸屬。郁建鋒等[40]結(jié)合12SrRNA和16SrRNA的序列為太湖流域河川沙塘鱧的分類提供了重要的幫助，發(fā)現(xiàn)了大量的變異位點和簡約位點，而且在兩種標(biāo)記的驗證下，比較得出太湖流域河川沙塘鱧與福建流域河川沙塘鱧已經(jīng)存在一定的遺傳差異。同時，系統(tǒng)發(fā)育樹分析表明，太湖流域河川沙塘鱧與其他鱧已存在遺傳分化差異。王慶容等[41]對長江中上游舞陽河、烏江、雅礱江、岷江和金沙江5個野生鲇(Silurusasotus)群體的親緣關(guān)系和遺傳差異進(jìn)行了分析，對比了核苷酸和單倍型多樣性，發(fā)現(xiàn)舞陽群體與其他群體的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。楊慧榮等[42]同時利用D-loop和cytb的序列對長江水系的赤眼鱒（Squoliobarbuscurriculus）進(jìn)行了遺傳多樣性的分析，通過遺傳變異率、單倍型多樣性等指標(biāo)發(fā)現(xiàn)長江赤眼鱒遺傳多樣性較高，種質(zhì)狀況較好；同時，根據(jù)Fst和分子變異等級差異分析發(fā)現(xiàn)，不同水系的群體存在明顯的遺傳分化；系統(tǒng)發(fā)育樹證明了珠江水系赤眼鱒與長江水系赤眼鱒正在逐漸分化為兩類群體，并提出cytb序列在變異顯著的群體間更能發(fā)揮作用。
孫希福等[43]利用cytb序列和D-loop序列分析了江豚（Neophocaenaphocaenoides）在鼠豚類及一角鯨類的分類地位，系統(tǒng)發(fā)育樹表明，江豚的遺傳距離與一角鯨科較為接近，并確定棘鰭鼠海豚、太平洋鼠海豚及黑眶鼠海豚3種群有較近的親緣關(guān)系，否定了之前僅憑借形態(tài)學(xué)的分類方式。畢瀟瀟等[44]在某一水產(chǎn)品公司采集了來自美國與荷蘭的狹鱈（Theragrachalcogramma）、太平洋鱈（Gadusmacrocephalus）、藍(lán)鱈（Micromesistiuspoutassou）和遠(yuǎn)東寬突鱈（Eleginusgracilis）4種不同屬的鱈魚，利用16SrRNA、cytb和COI序列比較了它們的序列結(jié)構(gòu)，根據(jù)核苷酸分歧速率以及NJ系統(tǒng)發(fā)育樹，將太平洋鱈、狹鱈和寬突鱈歸為一支，也顯示了它們較接近的遺傳距離，給分類學(xué)提供了非常重要的理論基礎(chǔ)。
4展望
線粒體分子標(biāo)記技術(shù)主要用于物種的遺傳多樣性分析、親緣、親權(quán)分析和物種進(jìn)化程度分析。該基因組功能重要且能穩(wěn)定遺傳，是物種個體基因組中變化速度較快且保留較好的部分。對D-loop區(qū)的序列進(jìn)行測序、比對、計算和分析后能得到物種的種屬分類、遺傳結(jié)構(gòu)、歷史發(fā)育情況和遺傳多樣性狀態(tài)。而且，D-loop區(qū)穩(wěn)定的母系遺傳，使得分析起源有較好可靠性，聚類分析結(jié)果準(zhǔn)確。同時，細(xì)胞色素b和16SrRNA等序列雖然進(jìn)化速度較慢，但其穩(wěn)定性的特征可以得到較好保留，獲得的插入、替換和缺失等突變可以持續(xù)遺傳，以作為數(shù)據(jù)分析的可靠依據(jù)。在進(jìn)行不同情況的分析時，可以結(jié)合一到兩種分子標(biāo)記技術(shù)，作為重要的輔助參考標(biāo)記。
綜上，在水產(chǎn)行業(yè)的遺傳分析中，野生群體的遺傳多樣性是將來進(jìn)行育種和引進(jìn)的關(guān)鍵，通過線粒體分子標(biāo)記技術(shù)對野生經(jīng)濟(jì)水產(chǎn)動物的遺傳結(jié)構(gòu)和遺傳多樣性分析是高效、準(zhǔn)確和可靠的。其中單倍型多樣性和核苷酸多樣性表現(xiàn)了分子結(jié)構(gòu)的變異程度，體現(xiàn)了野生群體種質(zhì)資源的現(xiàn)狀；遺傳分化特征能表現(xiàn)群體的基因交流狀況，表明了群體間自由的自由度；分子變異等級分析可以讓我們了解不同地域群體突變的來源，表現(xiàn)了群體遺傳結(jié)構(gòu)的差異；中性檢測等分析從分子層面揭示了魚類的系統(tǒng)發(fā)育狀況。
