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[中圖分類號] R927 [文獻標識碼] C [文章編號] 1674-4721(2012)12(a)-0137-03
《中藥鑒定學》是高等中醫院校中藥學專業的主干課程,也是藥物制劑、制藥工程以及中藥市場營銷方向的重要課程,同時也是中醫專業的選修課程。《中藥鑒定學》是專門研究中藥的來源、品種、質量、質量變化規律及中藥資源可持續發展的應用科學。學科起源于古代,形成于20世紀70年代,從最初建立到成熟經歷了幾十年的歷程。傳統的中藥四大鑒定法包括來源、性狀、顯微和理化鑒定,為解決中藥材的真偽、優劣和安全性方面作出了重要貢獻[1-2]。隨著現代科學技術的發展,多學科及新技術的滲透,多種中藥鑒定新技術和新方法應運而生,使中藥鑒別和質量評價更加準確、有效,并推動其向標準化、高速化、信息化等方向發展,成為了多學科的匯集點[3]。
正是在這樣的背景下,廣州中醫藥大學近兩年來的新開設了中藥學及其相關專業的限選課程《中藥鑒定新技術》,主要面向已經掌握了中藥學相關專業基礎的大四年級本科生講授。由于課程內容的新穎性、涉及技術方法的先進性和實用性,因此深受學生的歡迎和學校的重視。當前國內其他中醫藥院校尚未開始該課程,更沒有相關的專用教材,因此,如何才能建設好《中藥鑒定新技術》這門課程,提高《中藥鑒定新技術》的內容的針對性、實用性和有效性,一直以來都是相關教學人員面臨的重要問題,同時也在教學工作中不斷摸索教學內容和探討有效的教學方法。
1 課程的建設
中藥鑒定技術現代化是時展的要求,因此,在課程內容的設置上要盡量做到既體現現代學科發展的方向和水平,同時通過對學生的互動與調查,從有關市場就業等信息的反饋,了解中藥學相關專業學生的實際需求和行業用人情況,在傳統中藥鑒定方法的基礎上,選擇對于完善中藥鑒定的標準化和科學性有重要意義和發展前景的新技術作為重點講授內容,如色譜法、光譜法、中藥分子鑒定、毛細管電泳、X射線衍射、計算機圖像分析等技術;并進行實驗設計和綜合性實驗,使學生參與到教學實踐中來。
現代中藥鑒定新技術的發展,在形態組織鑒定新技術方面,采用組織體視圖像分析,用CCD攝像機直接參與對標本進行采樣,將采樣的圖像經格式的轉化后,用特定的圖像分析程序進行分析測定,將分別得到系列參數,尤其適合于混淆品種和近緣中藥的真偽鑒別及其原植物分類。在理化分析新技術方面,主要采用了UV、IR、TLC、GC、HPLC、CD、NMR、MS以及各種聯用技術,如GGMS、HPLGMS等,這些方法高效率地對中藥的化學成分進行廣泛深入地研究,可定性定量反映不同中藥間的差異,對復方中藥研究具有優勢。近年來,現代生物技術的新理論和新技術不斷地滲透到中藥鑒定領域,DNA分子遺傳標記技術在中藥鑒定中得到越來越廣泛的應用。另外,隨著越來越多的新技術融入中藥鑒定領域,使得工作中的實驗數據向多元化、復雜化方向發展,計算機模式分類技術把中藥樣品的信息特征轉化為計算機可接受的行列數據化矩陣,對中藥進行模式分析。除上述各種技術外,熱分析、電分析等化學、物理方法如X射線衍射分析技術、X射線熒光光譜技術等也被逐漸引入[4]。因此,在教學的目標和定位上,要求通過學習《中藥鑒定新技術》,學生能夠利用物理學、化學、熱力學以及分子生物學等多學科的先進技術,從化學、基因、細胞、組織、器官等多層次、多角度來研究和鑒定中藥,為中藥鑒定學的發展提供新的思路、技術和方法。
《中藥鑒定新技術》課程共36學時,內容設置包括:概論、紫外分光光譜技術及紅外分光光譜技術在中藥鑒定中的應用、薄層色譜技術在中藥鑒定中的應用、氣相色譜技術及毛細管電泳法在中藥鑒定中的應用、分子生物學技術在中藥鑒定中的應用、顯微成像分析技術在中藥鑒定中的應用、熒光光譜技術及X-射線衍射技術在中藥鑒定中的應用、高效液相色譜技術在中藥鑒定中的應用等8個章節,以及實驗一:顯微成像分析技術在中藥鑒定中的應用;實驗二:分子生物學技術在中藥鑒定中的應用。在每一種新的鑒定技術介紹過程中,詳細闡述了各新技術的概念、原理、研究現狀與優勢、具體操作步驟,應用范圍與展望以及應用舉例等幾部分內容。
課程的內容充分整合了近年來相關教師的理論教學和實踐教學經驗的相關資料和經驗,不僅開拓了學生的思維和視野,更有利于培養學生對大學四年理論知識的理解和綜合運用能力,有利于提高學生的實際工作能力,為學生今后從事中藥的真偽鑒別、品種整理、質量評價和開發應用打下堅實基礎,具有顯著的實際效益。
2 教學、科研、實驗相結合,提高課程教學的學術水平
隨著現代新技術、新方法的不斷應用,大量現代研究信息的獲取,中藥鑒定學科也在不斷地推陳出新,與時俱進,順應時代的發展,為有效提高中藥鑒定新技術的課程教學學術水平,必須充分將教學、科研、實驗相結合。教師們必須經常進行自身知識的積累和更新,加強科研能力的培養,親自參與到涉及有關新技術的實驗和課題項目中,只有在科研過程中積累了豐富的經驗和切身的體會,并將這些內容融入在課程的教學過程中,才可以使學生們能感同身受,更好地理解中藥鑒定新技術的相關背景知識,最新進展。
通過對學生的問卷調查和互動,學生在聽完第一次課后,通常會表現出來有濃厚的興趣,因為他們覺得不是中藥鑒定學課程的簡單重復,而是更深層次地了解中藥鑒定技術應用的廣泛和無處不在的實用性。有些內容是原來中藥鑒定學課程中未涉及到的。另一些實例可以證明,有些未選此門課的學生馬上會到老師這里詢問還能不能重新申報回到這個課程上來。
3 教學方法的創新
課程內容整合了教師的理論教學和科研實踐經驗,因此在授課時,教師結合自己的工作的親身體會,可以很真切地用實例比較不同發展時期中藥鑒定技術的發展特點。同時結合學生實際情況,可以從這門學科產生和發展歷程的角度談多學科交叉在中藥鑒定學中的應用成果。所以,學生們樂于接受這樣的教學方式。由于課程的內容相對比較靈活新穎,在教學方法上,也采取了多樣的方式,如討論式、講座式、啟發討論式、對比分析法等等,并充分利用多媒體,加強直觀教學,提高教學效果。配合相關章節,設計課外作業、學生實驗操作、教師示教實驗以及考核內容,充分調動學生自主學習的能力。
此外,在教學質量控制方面,由于傳統的考試方式多采用閉卷,形式較單一,帶有一定局限性,其內容不可能覆蓋全部學習內容, 考試內容死記硬背的較多,綜合分析的較少,且實踐考核缺乏。考慮到大四年級學生的學科基礎知識比較完善,以及本課程內容多樣化、相對比較新穎的特點,我們采用多元化開放式考核模式,教師擬定考試范圍,通過面試或請學生撰寫實驗設計、研究綜述,結合平時和實驗成績,進行綜合評定學生的實踐和創新能力。
4 面向中藥現代化,培養新世紀人才
現有任課教師分別具有不同專業背景,具有多學科交叉的優勢。結合植物分類學、中藥鑒定學、中藥資源學、生態學、分子生物學等基礎理論,分別從分子水平、細胞水平、個體水平和群體水平等不同層次研究藥材資源的分布特點、種群現狀、品種遺傳行為、相近親緣物種間及其種下不同農家栽培品種的鑒別,解決生藥的品種鑒定和品質評價研究中所遇到的技術難題,為種質資源鑒定、良種選育、藥材質量控制提供重要的科學依據。隨著《中藥鑒定新技術》課程的開展,與學術的互動也不斷加強,不僅培養了緊密結合中藥現代化發展特點的綜合應用型人才,也培養了一大批相關科研人才、教師團隊、教學人才和學術骨干,完善了有關學術論文和教材講義;通過教師進修和培訓,加強和擴大了與相關單位的學術交流。
5 存在問題分析
5.1 理論教學與實踐教學和結合不足
《中藥鑒定新技術》課程與學生將來走上工作崗位所從事的工作密切相關,因此,學生能主動、認真學習相關知識。但因課程學時數較少,并缺少最重要的實驗環節,對相關新技術實際應用操作練習,學習內容僅停留在基本的理論知識上,學習方法僅僅為理解記憶,影響學習效果。如學校缺少X-射線衍射儀等部分儀器設備,教師自身也沒做相關操作練習,在講課過程中無法進入深入地闡述。學生在學習基本理論知識后,缺少對熒光光譜儀、X-射線衍射儀等相關儀器設備的實際操作練習。
5.2 講授內容部分重疊
由于課程主要面向已經掌握了中藥學相關專業基礎的大四年級本科生講授。教師講授的內容與學生前期學習的理論知識可能有些會有重疊。因此在內容的選擇和教學設計上要更有針對性和實用性。
5.3缺少相關可借鑒經驗
當前國內其他中醫藥院校尚未開始該課程,課程的建設需要進行實踐探索;前期由于缺少相關配套教材,從學生反映來看,普遍還是認為手上沒有教材,光憑聽課和老師給的大綱樣的文字材料及講義,似乎不太習慣這樣的學習方式。因此配備適用性高的教材尤為必要。
6 課程展望
當前在國家倡導中藥現代化的新形勢下,各院校專業課程和學時均在變化,課程科目設置增多,而課程學時相對減少,因此,為了中藥鑒定工作的繼承和發展及提高中藥鑒定學的教學質量,我們應重新認真思考目前中藥鑒定學的含義和主要任務,同時探討其教學內容和教學手段的更新等問題。現代中藥鑒定學科發展的目標應是:建立包括基因組成特征、基因差異表達、化學組成和含量、植物形態、臨床療效等多層面的中藥鑒定學科體系,同時通過這種學科體系建設,為尋找和擴大新藥源提供可靠的指導資料[5]。除以上所述主要方法外,電化學分析、原子吸收光譜、等離子體光譜、X 射線熒光光譜、同功酶分析和 mRNA 差異顯示等方法也可用于中藥鑒定[6]。這些新技術的運用將逐步引導中藥鑒定向標準化、高速化、信息化發展。
由此可見,《中藥鑒定新技術》課程的建設中應在重視傳統技術的繼承的基礎上,重點介紹如何運用現代生物學及化學的理論和技術方法,解決中藥的真實性、中藥的有效性、中藥的安全性、中藥的質量和質量變化規律、以及中藥新資源尋找發現及中藥材規范化生產等可持續發展的理論和實踐問題,并通過實驗培養學生的探究素質以及應用理論知識的能力,使之成為適應社會需要的專業人才。
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>> 中藥鑒定學教學探討 “中藥鑒定學”實驗教學模式創新探討 對《中藥鑒定學》教學改革的思考 對高職中藥專業中藥鑒定學教學方法的探討 顯微鑒定法在《中藥鑒定學》理論教學中的改革初探 《中藥鑒定學》教學探析 中藥鑒定學教學體會 高職中藥學專業中藥鑒定學的實踐教學初探 中藥鑒定學實踐教學中建立實踐基地的探討 應用統計學專業的學科建設與實踐教學的研究 教育統計學中國化進程及學科建設的思考 論應用語言學的研究現狀和學科建設問題 系統論在中藥鑒定學精品課程建設中的應用研究 多種教學法相結合對提高《中藥鑒定學》教學質量的探討 醫學影像學發展方向與學科建設的探討 加強高校畜牧學優勢特色學科建設的探討 數字化技術在工程圖學教學中的應用研究 醫學免疫學教學中數字化平臺的應用研究 淺談數字化技術在人體解剖學教學中的應用 人體寄生蟲學數字化標本教學平臺的構建與應用 常見問題解答 當前所在位置:)。隨著教學改革在高等院校的深入開展,多媒體教學和網絡教學已漸漸顯示出它特有的優勢,并為廣大師生接受與認可。此種教學模式對數字化教材要求很高,需要設計和制作高質量的數字化教材。當前數字化教材已經成為現代信息技術和課程整合的媒介,因此下一步我們將鏈接搜索引擎和各種教育網站、專業網站、主題網站等社會資源,開發具有符合實際、及時可信、可用于多層次探究、可操縱處理、富有創造性等特點的數字化教材。包括數字音頻、教學視頻、多媒體軟件、專業網站、E-mail、在線學習管理系統、計算機模擬、在線討論以及數據庫等等。
2.2.1.3完成自我學習評價軟件-中藥鑒定學在線考試系統,所有考試題型全部由系統自動判分,可以設定是否要進行試題答案解析和分數顯示,考生是否可以查看自己試卷的權限。用于及時發現問題、獲取反饋信息。系統的遠程管理功能非常強大,提供了分類查詢、分類打印、分類刪除、分類試卷查看等功能。
2.2.2《中藥鑒定學》數字化教學方式的構建
筆者利用數字化平臺和數字化資源,在教師與學生之間開展合作學習、協商討論,并通過對教學資源的收集、探究知識、發現知識、創造知識以及展示知識的方式進行學習,具有資源利用、自主發現、協商合作和實踐創造幾種途徑[11-12]。《中藥鑒定學》數字化教學流程見圖1。
力求在教與學數字化環境的建設、信息技術與學科整合、教師課程重建、課程開發、教學過程重建能力、教師信息素養的提高與教師專業化發展等方面的理論和應用上求得突破。
教學素材庫包括了電子教學大綱、電子教材、授課教案、網絡多媒體課件、授課錄相、作業習題、網上測試系統、常見中藥材飲片圖庫、偽品藥材圖庫等,筆者已經完成了電子教學大綱、電子教材、部分授課錄像、大部分網絡多媒體課件、授課教案、作業習題等內容,正在完善常見中藥材飲片圖庫、偽品藥材圖庫。筆者與廣東力拓網絡科技有限公司合作開發,正進行虛擬實驗情境的設立,計劃完成顯微測量、中藥材常規檢查、120種重點藥材的性狀鑒別、40種中藥材橫切面組織與粉末的顯微鑒別、2種未知藥材混合粉末的鑒別等內容。
測評系統已經完成題庫建設,初步完成自我學習評價軟件――中藥鑒定學在線考試系統。擬將系統測評結果與學生在課堂上的自我評價相結合,作為考查學生掌握知識程度的最終評價。評價部分占最終課程期末成績的比例為20%~30%。
以中藥鑒定學精品課程網站為平臺載體,綜合教學素材庫、虛擬實驗情境、測評系統、討論交流工具,創立藥材鑒別的教學與實踐相結合的情境,教師指導學生進行思考、實踐,完成每種藥材鑒別知識框架的構建。根據個體的差異性,學生可以提出不同的問題和異議,反饋給教師;教師再根據學習個體的不同,可以逐個地進行不同層次的引導和啟發,也可以通過網絡共享的形式,建立公共分享系統,如微信群,讓學生可以在這種學習氛圍下,發表自己的見解。這種信息教學模式,為學生和教師營造了一個“輕松-開放-趣味性強”的新型教學氛圍,使這種信息教學模式進入一個良性的循環體,創建一個完整的創新教學模式[13-14]。
2.2.2《中藥鑒定學》數字化教學效果的評價
在整個教學過程中,安排3次專題探究:中藥鑒定學的歷史與發展、藥材的經驗鑒別、藥材市場調查。利用湖南邵東廉橋中藥材專業市場和長沙高橋藥材大市場見習環節,或其他社會資源,對學生進行課外分組,以報告或課程論文的方式完成,指導學生進行自我評價和互相評價,完善中藥鑒定學知識體系。
最終建立以“情境探究學習”模式為主,“藥材市場―專題探究―合作交流學習”模式為輔的中藥鑒定學數字化創新性教學模式,達到能使學生熟練掌握中藥材真偽鑒別理論與實踐知識的學習目標。
3小結
在網絡數字化的學環境下,教學模式必須不斷更新,使教學數字化、學習自主化、作業協同化,把培養學生學會學習、培養學生具有終身學習的態度和能力作為教學的培養目標。促進主動式-協作式-研究型的學習,從而形成開放高效的教學新模式,更好地培養大學生創新與實踐能力。縱觀國際上先進的教學模式,都已經通過數字化的信息處理技術,為學習者創造了一個富饒的學習寶庫。這種教學模式,無疑是教會學生如何運用數字化的信息技術成果,為自己終身的學習建立起一個知識資源寶庫。對于學生來說,擁有了主動學習的能力,才是真正學習的開始。
本研究完成后,對中藥及其相關專業學生的學習觀念和學習方式將產生巨大的影響,拓展《中藥鑒定學》教學的時空界限,能大大提高學生的學習興趣、效率和主觀能動性;使教育資源共享的原則得以貫徹,學習選擇的自由度大大提高,因需學習、因材施教真正成為可能,從而提高中藥專業的教育資源質量,促進優秀教育資源共享。不僅在校學生能受益,而且社會上的中藥從業人員也能受益,對中藥工作者的繼續教育將發揮重大作用。同時,能夠在社會上普及中藥鑒別的科學知識,為人民群眾的醫療保健作出積極貢獻[15-16]。
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【關鍵詞】技校 中藥鑒定學 教學改革
1 引言
中藥鑒定學是技校中藥學專業的一門中心學科,技校學生的就業去向主要是藥廠、藥店、醫藥公司等,這些單位的大部分崗位都要求學生具備一定的中藥鑒定學知識。而技校畢業生的知識和技能與社會的需求有較大的差距,技校現有的中藥鑒定學教學模式應根據社會需要進行必要的改革,教師在中藥鑒定學課程的教學方法上要多下工夫。
2 合理設計教學目標,激發學生學習的興趣
教學目標的定位要體現以學生為主體的原則,著眼于激發學生主動參與學習的積極性,使學生在學習知識、技能的過程中,不斷提高各方面的能力,尤其是創新能力。目前技校學生大多數入學分數較低,自我約束能力差;另外,加上家長的壓力、社會的偏見和自己認識上的偏差,使得他們內心產生一種自卑感和厭學情緒。因此,教育者要用高度的責任心和科學的管理方法把工作落到實處。 “要給人以陽光,你心中必須擁有太陽。”老師是教育者、領路人,只要老師心中擁有太陽,洞悉學生的心理,對學生教育動之以情,曉之以理,持之以恒,和風細雨,定然潤物無聲,教學工作才會做得更好,實現著名教育家葉圣陶說的“教是為了不需要教”,學生才會自尊、自立、自律、自強。
3 兩階段教學:理論教學與實踐教學相結合
中藥鑒定學課程可分為兩階段教學:第一階段理論教學,主要由教師講授,穿插提問式,讓學生掌握中藥鑒定學理論知識體系。通過制作多媒體教學課件、印制內部講義,使學生在課堂上進行思考交流互動,而不是忙于抄筆記。第二階段實踐教學,在教師的指導下,學生首先進行綜合實驗設計,自擬題目,最后以小論文形式提交實驗報告。另外,適當組織同學到校外參觀藥材市場。這樣,學生在本門課程結束后就具備了一定實際工作經驗和創新基礎。
3.1 教學手段多元化,教會學生學習方法
3.1.1 啟發式教學法
即教師在教學過程中根據教學任務和學習的客觀規律,從學生的實際出發,采用多種方式,以啟發學生的思維為核心,調動學生的學習主動性和積極性,促使他們生動活潑地學習的一種教學指導思想。在教學工作中要不斷向學生提出帶有啟發性、探索性的問題。盡量利用訓練的可操作性,讓學生在理解和應用上得到最大程度的提高。例如,在制作粉末制片時,為什么常加水合氯醛液透化?為什么透化后滴加稀甘油少許,再加蓋玻片觀察?
3.1.2 討論式教學法
這種教學方法更能培養學生的思維能力,提高學生學習的主動性和積極性,解決教學中學生的思維定勢和思維障礙,充分發揮群體優勢,從而取得更大的收獲。比如在學習基本操作時,提出問題:①你會使用顯微鏡嗎?②怎樣能規范、準確地量制片呢?③有哪位同學能演示操作嗎?
3.1.3 案例教學法
在教學過程中,教師以組織課堂為主,首先向學生布置題目,學生在辯論和教師指導中學到知識。上課時由教師隨機點名,讓學生陳述案件事實并回答問題,被點到名的學生若沒有準備好,可以“PASS”,但學習成績就要降一個檔次。同時教師要不拘一格,隨時發現問題,提出問題,再讓學生討論,最后進行總結。案例教學中,也要講授必要的理論知識,為了使學生對問題的討論更加深入,故意出些難題,讓學生辯論,使課堂氣氛活躍,只要學生講得有道理,能將自己的觀點闡述清楚,就能得高分。單一的傳統的系統講授模式,已與現代的教育觀念發生沖突,已不能完全適應現代教育和培養人才的需要,應予以調整和改變。因而,引入案例教學法模式來彌補傳統講授模式的不足就顯得越來越迫切了。
3.2 實踐教學多樣化,提高學生的技能水平
3.2.1 合理調整實驗內容
中藥鑒定學在實驗內容的選擇上,要充分體現“以就業為導向、以能力為本位、以發展技能為核心”的職教理念。教師要結合教材的理論知識和技校學生的特點,認真設計好每一次實踐教學內容,由淺入深、由易變難,堅持循序漸進的原則安排實踐課內容。
3.2.2改革實踐教學形式
對于技校學生中藥材的鑒定技術的培養,仍然以性狀鑒定和顯微鑒定為主,充分利用中藥標本和飲品,全天開放中藥標本室以供學生識別訓練;用多媒體課件將整體圖像與局部放大圖像有機結合的方式幫助顯微結構的觀察和鑒定。另外,學校應根據現有實驗條件開設一些比較前沿的中藥鑒定技術和方法,如氣相色譜(GC)、紅外色譜(IR)、高效液相色譜(HPLC)等,以開闊學生的視野,同時這也是未來中藥鑒定專業人才的必備素質。
關鍵詞:中藥,鑒定技術,進展
我國地大物博,蘊藏著極為豐富的中藥資源,據統計有12000種之多。但藥材種類繁多,來源復雜,既有同名異物、同物異名、一藥多名等普遍現象;又有來源不同、地區習慣用藥有別的客觀事實。不但貴重稀有藥材的偽劣品屢屢被發現,一些常用普通中藥也會有混淆品出現,并且同一藥材又有數種不同的等級規格;即使用同一藥材其活性成分含量也有波動。。因此以現代分析技術對中藥及其制品進行真偽鑒定、質量控制,對于中藥的經營、生產、質量監督和控制及臨床用藥都有重要的意義和實用價值。本文從各鑒定技術的原理、特性及其應用展開綜述。
1.顯微鑒定
顯微鑒定適用于含中藥粉末的制劑,是鑒別藥材真偽的最有效的手段之一,具有簡便、快速、準確的優點。
由于中藥的內部組織構造、細胞形態、內含物特征等,在不同的種群中是不同的,而在相同種群中則是一定的、固有的、比較穩定的,它不受外界因素的影響,因此常作為植物分類的依據。木質部的構造,導管的有無是區別被子植物及裸子植物的分界線,藥物粉末中的細胞形態、大小,所含內含物的種類、特征等可以用來區別不同的品種,所以該項技術可用來鑒定所用藥物的真偽。
另外,中成藥組成藥物多,中藥間的粉末顯微特征互相干擾,其鑒別遠比單味生藥粉末困難得多。通常根據處方,對各組成生藥的粉末顯微特征進行分析、比較,排除某些類似的細胞、組織及內含物等的干擾,選取各生藥在該成藥中較具專屬性的纖維特征,作為顯微鑒別依據。因此,單一粉末生藥的主要特征在制劑中有時不一定作為鑒別依據,而有些次要的特征反而起鑒別作用。王世清、鄭蕓[1]對婦科再造丸的研究表明,當歸、三七等的分泌細胞作為的顯微鑒定的特征而其鑒別作用。
2.色譜鑒定
2.1.薄層色譜法
薄層色譜法是將固定相載體均勻涂布在具有光潔表面的玻璃板或其他支持物上,用毛細管或適當點樣器將樣品液滴加薄層的起始線上待溶劑揮散后,置于展開槽內,用一定的溶劑展開,取出干燥,檢出或定量。在此過程中,不同的物質可以得到分離,但分離原理隨所用的固定相不同而異[2]。
TLC是一種快速、靈敏、高效地分離微量物質的方法,是最簡單的色譜技術之一,它具有操作方便、設備簡單、分離效率高、專屬性好、分離速度快、色譜參數易調整等特點,因而在中藥鑒定中的應用廣泛[3]。黃玉清[4]采用TLC鑒別牡丹皮及其偽品芍藥根皮,結果顯示,牡丹皮供試液與丹皮酚對照液位置上顯相同的紫色斑點,芍藥根皮供試液與芍藥苷對照液相應的位置上顯相同的藍色斑點。趙志軍[5]建立了益康膠囊的TLC鑒別方法,對方中組成藥物人參、黃芪、何首烏、丹參及甲基橙皮苷進行鑒別。結果斑點清晰,分離效果好,專屬性強,陽性對照無干擾。
2.2.氣相色譜法
氣相色譜是一種以氣體為流動相,液體或固體作為固定相的分離分析技術。具有高效、快速、靈敏、微量的特點,唯一局限之處在于所分析樣品應具有揮發性。氣相色譜技術已廣泛應用于中藥材揮發油分析[6-8]。
由于中藥揮發油成分復雜、種類繁多,氣相色譜技術作為揮發油分離分析的有力手段,可以用來建立中藥材揮發油及其成方制劑的指紋圖譜庫,為藥材鑒別、質量評價及成方制劑和生產過程中半成品的質量控制提供檢測方法。。王玉萍[9]以紫蘇葉中紫蘇醛為指標成分,采用內標法測定了不同產地、不同采收時間、不同放置時間紫蘇葉中紫蘇醛的含量,對紫蘇葉的質量進行了評價。
2.3.高效液相色譜法
高效液相色譜法是在經典的液相色譜法的基礎上,于20世紀60年代后期引入了氣相色譜法的理論,迅速發展起來的一種色譜分離技術。由于高效液相色譜法具有用量少、分離效能高、專屬性強、檢測靈敏度高、分析速度快、適用范圍廣(樣品不需氣化,只需制成溶液即可)、色譜柱可反復使用的特點,因而在重要鑒別與鑒定方面的應用廣泛。朱華等[10]采用高效液相色譜法對各種不同蛤蚧進行了鑒別,以防止以偽亂真現象。沙明[11]等利用高效液相色譜法的相對保留時間來鑒別地榆的真偽,還用峰面積比值來衡量該藥材的品質優劣,為地榆提供一種客觀、直觀的質量評價方法。張思巨等[12]利用高效液相色譜法確認了三種膠之間的內在差異,簡便、可靠地鑒別了阿膠、鹿角膠和龜甲膠,保證成品中所用阿膠的正源性。
3.紅外光譜鑒定
在藥物分析中,以紅外光譜具有的“指紋”特性作為藥物鑒定的依據,是各國藥典共同采用的方法。但通常僅限于西藥等單組分、單純化合物的鑒定。由于中藥材、中藥飲片和成藥本身都是遠比西藥復雜得多的混合物體系,它們的紅外光譜是組成它們的所有化合物的紅外光譜的疊加。因此對譜圖如何進行整體解析以及如何設法消除中藥主體成分的干擾等復雜而棘手的問題使得常規的紅外光譜法在相當長時期內令人望而卻步,從而未能在中藥質量控制和管理中發揮其應有的作用。
然而,將紅外光譜與計算機輔助解析技術(二維相關中外光譜法、模式識別和人工神經網絡等)有機地結合應用于中藥鑒定的若干報道,一系列的成果令人信服地向世人展示。這種將中藥學、數學、分析化學相結合,實現優勢互補的現代紅外光譜技術,無疑會在中藥的質量控制中扮演一個重要的角色[13]。劉小平[14]利用紅外光譜的測定數據進行分析,將相同波數的數值歸在一起,明顯得到六味地黃丸及其缺不同藥材后的紅外光譜的數據存在一定的差異。
4.DNA分子鑒定
DNA分子作為遺傳信息的直接載體,信息含量大,在同種或同品種內具有高度的遺傳穩定性,且不受外界環境因素和生物體發育階段及器官組織差異的影響,因此用DNA分子特征作為遺傳標記進行中藥鑒別更為準確可靠[15][16]。Shaw[17][18]等用AP-PCR對人參屬3種藥材人參、西洋參與三七及4種偽品桔梗、紫茉莉、土人參和商陸進行了鑒別研究,得到了能區別三種人參屬藥材與偽品的指紋圖譜。
5.聯用技術
5.1.氣相-質譜聯用技術
氣相-質譜聯用技術是將在標準電離條件下得到的大量已知純化合物的標準質譜圖存儲在計算機的磁盤里,作為已知化合物的標準質譜譜庫。然后將在標準電離條件下得到的、已被分離成純化合物的未知化合物質譜圖與計算機內存儲的質譜譜庫內的質譜圖按一定的程序進行比較,根據匹配度程度檢出這些化合物的名稱、相對分子質量、分子式、結構式和相似度,從而對未知化合物進行定性分析。
氣相-質譜聯用技術適宜分析小分子、易揮發、熱穩定、能氣化的化合物;用電子轟擊方式(EI)得到的譜圖,可與標準譜庫對比。馬松濤[19]等人利用氣相-質譜聯用方法分析了香紫蘇油的化學成分,為香紫蘇油的應用提供了依據。。
5.2.液相-質譜聯用技術
液相-質譜聯用技術自Horning于20世紀70年代進行開創性研究以來,經過20多年的發展已趨向成熟,各種商品化儀器相繼問世,而且應用日益廣泛,它集液相色譜的高分離效能與質譜的強鑒定能力于一體,對研究對象不僅具有足夠的靈敏度、選擇性,同時還能夠給出一定的結構信息,分析快速而且方便,具有其他分析方法所不能比擬的優點[20]。黎先春[21]等人采用HPLC-ESI-MS分析方法能很好的分離和鑒別穿心蓮內酯和脫水穿心蓮內酯。
除以上常用方法外,還有差熱分析法[22]、X-射線衍射法[23]、生物芯片法[24]、電鏡掃描法[25]、核磁共振波譜法[26]、示波極譜法[27]等新技術。
結語中藥鑒定技術的迅速發展,對中藥的真偽鑒別、質量控制有著重要的意義,它正向著標準化、科學化和信息化的方向發展。
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本次會議的主題為“分子生藥學發展、創新與人才培養”,(Development,innovation and talents fostering of molecular pharmacogonosy)主要圍繞以下議題進行討論與交流:① 分子生藥學研究新方法;②道地藥材形成的分子機制策略;③ 藥用植物(菌物)次生代謝產物的生物合成與代謝調控;④ 瀕危珍稀中藥資源研究;⑤ 藥用植物有效成分合成生物學研究;⑥ 藥用植物的分子鑒定。
大會特邀嘉賓:黃璐琦研究員(中國中醫科學院中藥資源中心主任),高文遠教授(天津大學天然藥物研究院主任),劉塔斯教授(湖南中醫藥大學),張重義教授(福建農林大學),劉春生(北京中醫藥大學)以及韓國東亞大學的Byung-Rae Jin教授,Jung-Kwan Lee教授和 Ho-Won Jung教授等四十余位專家學者蒞臨大會。
時間:9月18-20日
地點:凱賓斯基飯店。
研討會征稿截止時間:2015年9月12日
論文摘要:本文論述了中藥鑒定技術實臉操作技能和在實際工作中學生素質培養應若手的方向。充服不利因素,改進操作方式,提高學生動手的熱情,運用嘗試法教學,培養學生的妞織協調,合作的能力,多嫌體應用,提高學生形象思雄能力素質,結合行業對手生提出的妥求,適當調整實臉項目與內容;根據中職學生的特點,完善考核評分標準:實臉教畢中的自我教育管理,形成良好的學習氛網。
中藥鑒定技術是一門以形態教學為主的學科,是中藥類專業必修的一門專業課,具有很強的實踐性。實驗教學是提高學生實踐能力,增強學生社會適應力的必備環節。中藥鑒定操作技能,增強中職生在醫藥行業的適應能力,是從事中等職業學校中藥鑒定技術教學工作的老師們一直思考的重要問題。為此,在實際的實驗教學中做了以下幾方面的嘗試。
1克服不利因素,改進操作方式.提高學生動手的熱情,熟練掌握實驗技能
實驗手段以傳統的標本、掛圖、投影、顯微鏡為主m。原存在對教學不利因素:藥材標本、掛圖品種數量不足,導致學生無法直觀認識藥材,影響教學效果。人均擁有顯微鏡數量的相對缺乏,導致部分學生學習的參與性降低,對同組的學生依賴性增強,每次實驗都坐享其成,將結果復制就完事,逐步地對實驗不感興趣。現在,學校對學生操作技能培養的重視,購買藥材和顯微鏡,克服不利因素,為每個學生提供一份150種常用重點中藥材的飲片;實驗操作時做到人手一臺顯微鏡。考慮中職生的基礎以及自覺性、教學目標,為了增強學生學習的興趣,改變實驗過程中的形式迫在眉睫。原來要求:借助顯微鏡,找到目標后按放大倍數比例直接將特征描繪到實驗報告上。對大部分學生來說,畫圖是一項難度很大的事情,學生經常是找到正確的目標,但是無法很好的繪制特征,而導致分數較低,久而久之學生便失去尋找目標的動力,直接照著課本的圖進行復制,因為這樣分數還挺不錯的。這樣是非常危險的信號,學生連動手的熱情都沒有,就談不上熟練掌握實驗技能。現在,我們采取了一種方式,就是讓學生找到目標后首先是用手機(具照相功能)進行拍照,得到清晰的圖片,然后參照自己拍照的圖片完成實驗報告的畫圖步驟。圖片編輯好后(編輯內容包括圖片特征的名稱、學號)統一交給課代表,課代表將全班的圖片文檔交給老師,做為評分的參考。實踐證明,學生為了拍到清晰的圖片,制作臨時裝片時比以前更認真仔細更加規范,原來對顯微鏡不感興趣的學生也慢慢地和顯微鏡培養起感情來。原來只會按部就班的學生學會觀察、描述、比較歸納。克服不利因素,改進操作方式,提高學生動手的熱情,熟練掌握實驗技能。
2嘗試法在實驗教學中的應用,培養學生的組織協調、合作的能力
中藥鑒定技術實驗教學多采用傳統的“注入式”教學方法,現應用嘗試教學法就是讓學生自主預習,學生查閱資料、思考、培養學生的創新思維,培養學生自己分析問題、解決問題的能力。具體的做法是:以一個班為單位,分成六組,選出小組長,職責主要是組織和協調。由教師下達任務給組長,在規定的時間內,完成一堂實驗課的教學課件。結合組員的特點,組長就任務給各組員分工。中藥鑒定技術學得較好的學生進行資料查閱以及篩選材料;語文水平較好的學生負責文字處理。計算機基礎較好的學生負責將收集到的資料進行整合制作成PPT課件;語言表達能力較強的學生來完成教學課件的講解。最后教師進行簡短而針對性的點評,接著讓學生開始實驗操作。應用嘗試法教學改變過去“老師講一學生學”滿堂灌的教學模式,采用“學生學一學生講一老師點評”的方式,摒棄老師過多的講解、分析,學生學習目的性更明確,學習興趣更濃烈,學習積極性更主動,課堂氣氛更活躍,教學效果更顯著。通過應用嘗試法教學,改變教學中教師的角色,體現學生為教學的主體的地位,培養學生的自學能力,掌握學習的方法,培養學生的組織協調、合作的能力,及時適應工作中的學習。學會積極主動學習,自主獲得知識,也為將來的自主學習打下堅實基礎。
3多媒體在實驗教學中的應用,提高學生形象思維能力素質
傳統教學手段(實物標本、掛圖、投影等)難以滿足該學科多內容、多視角的教學需求,常用的掛圖、投影雖然較為客觀,但仍較失真和抽象,幻燈片、蠟液標本也與實際效果相差很遠;加上一般藥材的體積很小,實驗顯微視野也較小,教師無法保證每個學生能達到相同的教學效果,這造成學生難理解,動手能力差,對老師依賴強,增大老師負擔、壓力大等不利因素,學生也為死記硬背書本的術語而倍感枯燥。多煤體為改進傳統教學手段提供了契機,將教學過程中的抽象內容利用課件在屏幕上通過動畫或圖片,配以相應的文字說明,直觀展現給學生,學生則一目了然,并且印象深刻,使學生較容易掌握難點重點的內容,提高學生形象思維能力素質。比如常用顯微制片能力的教學中,我們通過規范正確操作視頻和一些學生錯誤不規范操作視頻的比較,收到良好的教學效果。 轉貼于
4結合行業對學生提出的要求,適當調整實驗項目與內容
行業對學生提出的要求,體現教學的實用性,是指實驗項目與內容的選擇性和適應性,具體地說就是根據不同的專業培養目標或方向選用與之相適應的中藥鑒定分析技術,如中藥專業營銷方向重點只要掌握常用中藥材性狀鑒定技術!7。性狀鑒別是對藥材的形、色、氣味、大小、質地、斷面等特征、簡單理化反應,直接觀察藥材,做出符合客觀實際的結論,區分藥材真偽優劣的方法。結合行業的要求,學生須快速、準確辨認常用中藥材。精心組織實驗教學內容是課程改革的關鍵閉。據此增加歸類實驗項目,如術語來表達藥材外形特征—野山參:馬牙蘆、燈草芯、棗核、鐵線紋、人字腿、珍珠須,天麻:鸚哥嘴、紅小辮,防風:蛆圳頭,川貝:懷中抱月。海馬:馬頭、蛇尾、瓦榜身,薪蛇:龍頭虎口、方勝紋、連珠斑、佛指甲,形象的語言描述斷面一一傾看蔑:金井玉欄,粉防己:車輪紋,何首烏:云錦花紋,大黃:星點,蒼術:朱砂點,天然牛黃:同心層紋等特征。在實驗項目中增加部分有代表性藥材的快速鑒定技術.一-水試法,如冤絲子、沒藥、乳香、秦皮、紅花、西紅花等。而中藥專業中藥藥劑方向則尚需掌握中藥顯微鑒定[7J等。為了更好達到教學目標,增加歸類實驗項目,以植物類藥材為例,簇晶的觀察:大黃、人參、關木通、牡丹皮;針晶的觀察:半夏、麥冬、天麻、肉桂等;石細胞的觀察:黃柏、黃連、厚樸、肉桂;樹脂道的觀察:人參、三七;通過代表性的專項實驗,逐步訓練學生掌握各種植物組織、細胞及后含物的識別與繪制,從而訓練學生實踐應用的能力,更好的符合實際工作的需要。
5根據中職學生的特點,完善考核評分標準
首先教師要轉變觀念,明確我們培養的學生應具備怎樣的素質。主要培養學生具備基本的中藥鑒定技能,嚴謹科學的工作態度,合作協助的精神等綜合素質,適合醫藥相關行業工作的能力。中職生的基礎不夠扎實,學習自覺性不強,但他們有一個共同點,對加分非常“感冒”。利用這一特點,我們要創造條件發現學生的閃光點,及時表揚,對基礎較差的學生的學習自信心培養具有十分重要的意義,對學生的教學效果提高也具有重要的意義。因此我們對考核評分標準進行完善,靈活地加入一些激勵措施。在實際教學中,如顯微鑒定實驗課,每次實驗提供24個加分名額,(最快找到指定特征的、最快拍照到指定特征的各6人),還根據情況可適當增加加分名額;制作標本片效果好的前12名。實踐證明,這些激勵措施能較好的提高學生學習的自覺性和積極性且教學效果顯著。此外,最快找到正確特征的學生可充當小老師,學生間相互交流心得、方法,形成良性競爭的學習氛圍。
6買驗教學中的自我教育管理,形成良好的學習氛圍
在醫學研究領域,領域內專家、學者通常基于定性的研究方法,在大量閱讀文獻的基礎上,依據其研究經驗及積累主觀性地識別某領域或學科的研究熱點,形成綜述類文獻或報告,以供借鑒。2003年,肖培根院士[2]撰文指出:21世紀,基因技術與中藥新藥創制、信息技術與中藥的發展、中藥的可持續發展、中藥現代化及國際化將成為領域內熱點研究方向;2014年,李秀才[3]指出,抗腫瘤血管生成為中醫治療腫瘤的熱點研究方向之一,并總結了抗腫瘤血管生成的動物類中藥、植物類中藥、中藥復方及其有效成分;2011年,Guan等[4]論述了質量控制、指紋圖譜、多組分定性、定量研究等與中藥研究相關的熱點問題;2014年,旺建偉等[5]總結了中醫藥動物模型的研究思路、造模方法,指出中醫藥動物模型的評價將趨于客觀化、標準化、規范化,更多的病證結合動物模型將得到完善。此類文獻對我國醫學研究具有一定的推介作用,但此類研究多為前瞻性研究,需要文獻著者具備敏銳的洞察力及較高的學術造詣,主觀性較強。
近年來,部分學者借助文獻計量學領域的理論及方法,從定量的角度識別醫藥衛生及其相關學科的研究熱點,并以可視化的方式呈現。高雪等[6]基于1995—2010年WOS數據庫中有關蛋白質組學的文獻信息,得出質譜技術為蛋白質鑒定的核心技術以及蛋白質翻譯、修飾和相互作用為國際研究熱點之一的結論。張明華等[7]基于1986—2009年WOS數據庫中認知神經科學領域的文獻信息,識別出PET技術為認知神經科學研究的重要工具,以前額葉皮質、大腦、活化為主的神經科學以及以記憶、注意力為主的認知科學為該領域的研究熱點。趙蓉英等[8]以WebofKnowledge為數據源揭示出中醫的基礎理論研究、中西醫結合研究、基因技術在新藥研制方面的應用為國際中醫研究的熱點研究領域。黃卓泳等[9]以1990—2009年WOS數據庫中中醫藥類研究論文為研究對象,發現1990—1999年中醫藥的藥理作用研究為中醫藥領域研究重點,2000—2009年側重于中藥作用的物質基礎研究。沈建通等[10]以Medline和CNKI數據庫中循證醫學相關文獻的mesh主題詞及關鍵詞為研究對象,基于共詞分析法、PFNET算法及可視化技術發現國內外循證醫學領域的7個研究主題。
綜合以上學者所展開的研究,可以發現:(1)信息可視化分析方法已用于識別醫藥衛生領域內相關學科及領域的研究熱點,但多局限于單一學科或單一研究方向,較少涉及我國中醫學學科交叉研究領域;(2)在數據來源上,此類研究大多依賴于國外數據庫生產商所提供的信息,此類數據在數據采集過程中對學者的檢索技巧、領域知識及英語水平均提出了較高的要求,無法同時保證查全率及查準率。究其原因是國內專門的醫學引文數據庫較少,部分數據庫僅提供引文查詢功能[11],無法全面揭示我國中醫學學科交叉領域研究熱點。因此,筆者所在研究團隊以《北京大學中文核心要目總覽(2011版)》所收錄的248種醫藥衛生類核心期刊作為初始數據采集樣本,創建專門的引文索引數據庫——中文醫藥科學引文索引數據庫(ChineseMedicineSciencesCitationIndex,以下簡稱CMSCI)。目前該數據庫中包含2004—2012年來源文獻855669篇,參考文獻8079116條,作者信息3549674條,數據量較大。
1數據來源及研究方法
1.1數據來源
揭示我國中醫學學科交叉領域研究熱點為本文的核心目標,因此識別中醫學學科交叉文獻為本文的首要問題。依據現有的期刊目錄能較為直觀地界定文獻所屬學科,諸多學者[12-14]以此作為分類標準展開研究,但諸如大學學報類期刊通常刊載多個學科論文,難以歸入某個特定的研究領域,因此筆者擬從描述文獻分類信息的中圖分類號入手,發現我國中醫學學科交叉文獻。《中國圖書資料分類法(第4版)》[15]中,醫藥衛生類學科分類號以英文字母“R”開頭,我國中醫學學科分類號以“R2”開頭,據此筆者規定:文獻分類號中至少包含2個醫藥衛生類中圖分類號且其中至少有1個為我國中醫學學科分類號的文獻為中醫學學科交叉文獻。需要特別說明的是醫藥衛生類中,“R-0一般理論”“R-1現狀與發展”“R-3醫學研究方法”3類文獻綜合性較強、難以歸為某個特定的學科,為最大限度保證分析的客觀性與準確性,筆者剔除了該部分數據,最終于CMSCI數據庫中獲得2004—2012年中醫學學科交叉領域文獻13259篇,并收集文獻關鍵詞字段,得到2004—2012年中醫學學科交叉研究領域內未經形式歸并、語義識別的初始關鍵詞81626個,擬據此識別我國中醫學學科交叉研究領域研究熱點。
1.2研究方法
信息可視化分析方法為本文的主要研究方法,知識圖譜為信息可視化的主要表達方式之一。近年來信息可視化領域的專家逐漸重視可視化工具的開發及應用,主要有CiteSpace、Ucinet、VosViewer、Bibexcel、SPSS[16]等,其中CiteSpace軟件為一種多元、分時、動態的復雜網絡分析工具,所繪制的科學引文網絡圖譜能夠展示某個學科最新的前沿領域及其演化進程[17],因此筆者借助該軟件繪制中醫學學科交叉研究領域關鍵詞共現知識圖譜,以識別領域內研究熱點。
學科或領域研究熱點往往與時間高度相關,因此筆者將2004—2012年9年度的中醫學學科交叉文獻數據以時間片段等分為3個時間片段,分年度識別中醫學學科交叉研究領域的研究熱點,以期揭示中醫學學科交叉研究領域的發展脈絡。此外,CiteSpace軟件僅識別從WebofKnowledge中下載的文獻格式[16],因此筆者借助VisualStudio2005以C#為編程語言,自編程序“CMSCI_TO_CITESPACE”以完成CMSCI數據庫中數據格式的轉化。我國中醫學學科交叉領域研究熱點識別過程見圖1。
2中醫學學科交叉研究熱點可視化分析
關鍵詞通常由發文作者依據文章主要內容自行標注形成,旨在高度概括文獻的主要內容,但同時存在著(1)關鍵詞意義一致,但表達方式不一致,如“高效液相色譜法”同時存在著“HPLC法”“hplc”“色譜”“高效液相”“HPLC法測試濃度”等。(2)關鍵詞含義相近或相似而表達方式不一致,如“胃癌”會被同時標注為“胃腫瘤”等,因此筆者對關鍵詞展開了數據清洗工作,主要包括含義相同或者相似關鍵詞的歸并以及無實際分析意義關鍵詞的剔除2個步驟,以保證數據分析結果的可靠性。
2.12004—2006年中醫學學科領域研究熱點分析
為揭示2004—2006年中醫學學科交叉研究領域的研究熱點,采集此時間片段內經過初步清洗的關鍵詞數據,導入CiteSpaceIII軟件中,進行如下設置:(1)以文獻關鍵詞字段作為分析節點;(2)2004—2006年3年數據作為一個時間切片;(3)選取PFNETs[18-19]為減枝算法;(4)采用閾值插值組合(thresholdinterpolation)控制知識圖譜中節點及連線數量(在識別其他時間片段研究熱點的過程中,只修改時間切片字段,若無特殊說明,初始設置與此類似,下文將不再贅述)。
需要說明的是設定閾值插值組合生成知識圖譜的過程需要經過大量實驗,以得到聚類效果較好的知識圖譜,筆者通過大量實驗,最終發現設定閾值插值組合(c,cc,ccv)分別設定為(1,1,1)、(1,1,1)、(15,1,5)聚類效果較好,所形成的知識圖譜見圖2。
綜合分析圖2及表1,可以看出“藥物鑒定”“高效液相色譜法”“中醫藥療法”“動物模型”“細胞周期”5個關鍵詞詞頻較高,構成2004—2006年中醫學學科交叉領域主要研究方向,進一步解讀圖2歸納其研究主要集中于以下幾類主題。
2.1.1中藥質量鑒定與化學成分研究(#C1)中藥化學成分研究是中藥現代化研究的基礎,使用鑒別能力強、準確率高且快速的技術手段對中藥化學成分的快速鑒定具有重要作用。采用高效液相色譜法、反相高效液相色譜法以及薄層色譜法3類方法依據回收率、相對標準偏差對藥物質量及藥物化學成分進行鑒定,表明2004—2006年高效液相色譜法、反相高效液相色譜法以及薄層色譜法為中藥化學成分研究的重要手段。
2.1.2中藥抗腫瘤機制及其效應成分研究(#C2)聚類#C2中姜黃素[21]、小檗堿[22]、苦參堿[23]3種物質為中藥有效成分,均與“細胞周期”聯系緊密,原因為其抗腫瘤作用與調控細胞周期、影響細胞增殖有關。同樣,黃芪因其主要提取物黃酮可誘導細胞凋亡,故與“細胞周期”共現次數較多。此外,bcl-2基因作為近年來研究腫瘤細胞凋亡的熱門原癌基因,在聚類#C2中也與“細胞周期”共現次數較高。
2.1.3動物模型實驗方法研究(#C3)聚類#C3中關鍵詞“動物模型”與“腦缺血”“骨質疏松”共現,表明2004—2006年中醫學學科交叉研究領域對腦缺血動物模型及骨質疏松癥動物模型的造模方法較為關注,此2種疾病動物模型的建立對發揮中醫藥治療的優勢有重要意義。電針療法為近年中醫針灸學中較為新興的療法,該方法用針刺入腧穴以微量電流波刺激穴位,進而達到治療疾病的目的,在聚類#C3中關鍵詞“動物模型”與“電針”直接相連,表明在2004—2006年運用動物模型來研究電針治療疾病的效應機制為其領域內研究方向之一,該研究方向的形成同樣表明中醫學學科交叉研究領域注重利用現代醫學研究手段與傳統醫學治療方法相結合。
2.1.4高脂血癥及糖尿病的中醫藥療法研究(#C4)高脂血癥與糖尿病都是常見而多發的代謝性疾病,是引發心腦血管疾病的重要危險因素。隨著飲食結構的改變及飲酒量的上升,二者患病率也在逐年增加。其與“中醫藥療法”共現,表明中醫藥療法對代謝性疾病的治療有一定的療效。中藥復方可通過多靶點、多途徑來調節脂代謝,改善血液流變學,防治高脂血癥及糖尿病[24]。
2.1.5中藥黃酮類化合物的分離、提取、鑒別及不同中藥炮制方法對其的影響(#C5)該聚類的形成側面表明黃酮類化合物為中醫藥學學科交叉研究領域的研究熱點。
2.22007—2009年中醫學學科領域研究熱點分析
某個學科或研究領域發展的過程中,研究熱點要么針對于歷史問題進行理論、方法、技術上的深入研究,尋找學科或領域內的新增長點,要么針對新的科學問題展開新的研究,對研究熱點及其關注程度往往會發生不同程度的變化。
為識別2007—2009年中醫學學科交叉文獻研究熱點,并將其與2004—2006年研究熱點進行對比分析,筆者將該時間片段內經過數據篩選后的關鍵詞集合導入CiteSpaceIII軟件。通過多次實驗模擬,最終確定閾值組合為(1,1,1,)、(1,1,1)、(19,1,5),所得到的79個關鍵詞節點、68條關鍵詞連接線形成的關鍵詞共現知識圖譜聚類效果較好,見圖3。為揭示圖3中的主要內容及重點信息,筆者統計了2007—2009年詞頻位于前15位的關鍵詞的詞頻、中心度值,見表2。
較2004—2006年,此時間段關鍵詞共現知識圖譜中較多節點擁有較高中心度值、網絡結構較為復雜、連通度較高,表明中醫學學科交叉研究領域逐步具有了共同研究方向,研究理論方法不斷成熟。
結合圖3及表2,對比2004—2006年關鍵詞共現知識圖譜,可知:中藥質量鑒定與化學成分研究(#C1)、中醫藥抗腫瘤機制及其效應成分研究(#C2)、動物模型實驗方法研究(#C3)、高血糖癥及糖尿病的中醫藥療法研究(#C4)同樣為2007—2009年中醫學學科交叉研究領域的研究重點,但圖3各聚類網絡結構復雜度均有所增加,表明各研究方向的廣度有所擴展。
此外,與2004—2006年相比,2007—2009年中醫學學科交叉研究領域形成了新的重點研究方向:(1)聚類#C5中,關鍵詞“中西醫結合治療”與“心力衰竭”直接相連,表明中西醫結合治療心力衰竭構成中醫學學科交叉研究領域內重點研究方向。筆者通過查詢CMSCI數據庫原始文獻發現,中西醫結合療法在防治心力衰竭具有較好的療效,醫者可依據患者心力衰竭癥狀選擇合適的治療策略[25]。(2)藥品不良反應是指合格藥品在正常用法用量下出現的與用藥目的無關的或意外的有害反應。隨著中藥新品種、新劑型的不斷開發,中藥引起的藥物不良反應和藥源性疾病也呈增加趨勢[26],在聚類#C6中表現為“中醫藥”與“不良反應”直接相連,表明我國中醫藥學科交叉領域對中醫藥使用過程中的不良反應較為注重,成為領域內另一個研究方向。
2.32010—2012年中醫學學科領域研究熱點分析
為識別2010—2012年中醫學學科交叉領域研究熱點,以期為領域內研究者確定研究方向提供思考,筆者同樣借助CiteSpaceIII軟件識別該時間段領域內研究熱點,經過初始設置、多次模擬,最終確定閾值插值組合為(1,1,1)、(1,1,1)、(8,1,7),得到76個關鍵詞節點,69條關鍵詞連線,所形成聚類效果較好的知識圖譜見圖4。
與前2個時間片段類似,筆者對關鍵詞的基本信息進行了相關統計,得到詞頻位于前15位的關鍵詞詞頻及其中心度,見表3。
圖42010—2012年中醫學學科交叉領域關鍵詞共現及聚類知識圖譜Fig.4KnowledgemappingofhighfrequencykeywordsininterdisciplinaryfieldofChinesemedicineduring2010—2012
圖42010—2012年中醫學學科交叉領域關鍵詞共現及聚類知識圖譜Fig.4KnowledgemappingofhighfrequencykeywordsininterdisciplinaryfieldofChinesemedicineduring2010—2012下載原圖
表32010—2012年中醫學學科交叉領域高頻關鍵詞基本信息統計Table3StatisticsofhighfrequencykeywordsininterdisciplinaryfieldofChinesemedicineduring2010—2012下載原表
表32010—2012年中醫學學科交叉領域高頻關鍵詞基本信息統計Table3StatisticsofhighfrequencykeywordsininterdisciplinaryfieldofChinesemedicineduring2010—2012
由圖4及表3,與2007—2009年對比發現,高效液相色譜法、細胞周期、藥物鑒定、中醫藥療法、動物模型仍然為2010—2012年高頻關鍵詞,中藥質量鑒定與化學成分研究(#C1)、中藥抗腫瘤機制及其效應成分研究(#C2)、動物模型實驗方法研究(#C3)三大研究方向延續性較好。
糖尿病的中醫藥治療構成2004—2006年以及2007—2009年的主要研究方向之一,聚類#C4中,關鍵詞“糖尿病”未與“中醫藥療法”直接相連且位于不同聚類中,但其與中藥“三七”直接相連,同樣從屬于糖尿病的中醫藥治療,可視為2010—2012年我國中醫學學科交叉研究領域的主要研究方向之一,側面表明中醫學學科交叉研究領域內采用中醫藥療法治療糖尿病,在研究程度上得到了進一步深入。
圖4中,關鍵詞“caspase-3”首次出現于關鍵詞共現知識圖譜中,與“細胞周期”直接相連,通過查證發現caspase-3是細胞凋亡過程中最主要的終末剪切酶,與細胞周期關系緊密,該共現關系的出現表明2010—2012年我國中醫學學科交叉研究領域關于中醫藥作用細胞周期研究的進一步深入。此外,聚類#C2中,關鍵詞“細胞周期”與“抗腫瘤”直接相連,且二者均為高頻關鍵詞,進一步研究現有文獻,筆者發現國內已有相關研究發現姜黃素、大黃、苦參堿能夠對某些腫瘤細胞的增殖產生影響,可能是其抗腫瘤作用的效應途徑。綜上,中藥作用于腫瘤細胞周期,進而誘發細胞凋亡,影響其增殖為近年來我國中醫學學科交叉領域的研究熱點。
3結語
本文以《北京大學中文核心要目總覽(2011版)》所列之248種我國醫藥衛生領域內中文核心期刊文獻數據為基礎數據,基于《中圖分類號(第4版)》識別我國中醫學學科與醫藥衛生領域內其他學科之間的交叉文獻,借助CiteSpaceIII可視化軟件對其關鍵詞展開共現、聚類分析,最終以3年為時間片分年度揭示2004—2012年我國中醫學學科交叉研究領域研究熱點,得出以下結論:(1)2004—2012年,中藥質量鑒定與化學成分研究、動物模型實驗驗方法研究、中藥抗腫瘤機制及其效應成分研究以及高血脂癥與糖尿病的中醫藥療法研究一直為我國中醫學學科交叉研究領域的研究熱點,此類研究方向的形成說明在我國中醫學學科交叉研究領域,中醫學與藥學的學科交叉為領域內學者學科交叉行為的主要表現,所形成的四大研究方向延續性較好,不同時間片段研究重點有所側重。(2)2004—2012年,高效液相色譜法、反高效液相色譜法、薄層色譜法3種實驗方法成為我國中醫學學科交叉研究領域方法中的重要手段,進一步表明在學科交叉研究領域內,我國中醫學與藥學學科交叉得到了廣泛關注,中藥質量鑒定與化學成分研究為該領域內研究熱點。(3)2004—2012年,中醫藥療法、中西醫結合療法構成學科交叉研究領域內的重點治療方法。傳統中醫治療在既有臨床療效的基礎上,運用現代科學技術探討治療某些中醫優勢疾病,如中醫藥抗腫瘤、中醫藥防治高脂血癥及糖尿病、電針治療疾病的效應機制等。
【關鍵詞】紅外光譜;大黃;真偽鑒別
大黃是常見中藥材之一,乃蓼科大黃屬植物,具瀉下、利膽、護肝、活血等功效,其屬種繁多,約60余種,然具藥用價值的正品大黃僅為掌葉大黃、唐古特大黃及藥用大黃3個品種的干燥根及根莖[1],報道顯示:混淆品大黃服用后容易引發腹痛[2]。因此,如何鑒定正品大黃以保證其臨床療效,是我們面臨的難題之一。然,目前對其鑒定多以外部形態以及從性狀、顯微觀察和理化分析等角度進行,這些方法對于塊狀大黃鑒別頗有成效,但對粉末狀大黃的區分卻難以進行區別[3],近年來,隨著現代分析檢測技術的進步和計算機科學的日新月異,紅外光譜法漸次應用到中藥樣品的相關監測之中[4],從而為快速、準確鑒別正偽品提供了可能。本研究即采用紅外光譜法對正偽大黃進行監測,報告如下:
1 研究對象與方法
1.1研究對象正品大黃:產于西寧的唐古特大黃。混淆品大黃:華北大黃。正偽品大黃的樣品均由我市藥品檢驗所提供并作生藥學鑒定。將大黃樣品充分粉碎均勻,過孔徑篩后備用。
1.2研究方法Perkin-Elmer公司生產的Spectrum GX型紅外光譜儀(光譜范圍:4000~400 cm-1);DTGS檢測器(相關參數設置:分辨率為4 cm-1,掃描頻次為16次,掃描時實時扣除水和二氧化碳的干擾,速度為0.2 cm-1/s);溫控范圍在室溫至110℃的可編程溫度控制單元和變溫池(直徑38 mm,厚度為10 mm)。正偽品大黃樣品分別與溴化鉀粉末一起研磨壓片,附著在變溫附件樣品架上,自50~110℃之間,每間隔10℃進行光譜圖測定。
1.3數據處理測量若干次后將樣品池取出搖動,使樣品池中的樣品得到填充,以便保證樣品數據的代表性和準確性,每個樣品掃描測量50次,然后取其平均值作為該樣品的光譜。樣品的掃描測量數據以ASCII碼存儲,而后采用另外一臺計算機進行分析處理。
2結果
2.1正偽品大黃的紅外光譜圖比較如圖所示,正偽品大黃的紅外譜圖比較接近,如用肉眼很難進行鑒別。通過相關數據分析可見,兩者僅在波峰上存在差異。結果見圖1。
圖1真偽大黃的紅外光譜圖
2.2正偽品大黃紅外光譜數據分析采用清華大學開發設計的二維相關紅外軟件,分別獲得正品大黃和偽品大黃變溫過程的二維相關分析譜(圖2、3所示)。在1030~1170 cm-1區域內,正品大黃和偽品大黃的二維相關紅外光譜中可見在圖2中的對角線上,正品大黃出現了2個較強的自相關峰,而圖3中的偽品大黃僅出現了1個自相關峰。其中正品大黃在1060和1080 cm-1處出現了所對應的基團振動峰的位置,而偽品大黃僅僅在1080 cm-1處出現自相關峰,其余未見。此種現象說明偽品大黃的相關譜中1060 cm-1對應的基團隨著溫度的升高沒有發生相互作用。可見,正品與偽品大黃相比,無論從自相關和交叉相關,還是同步譜或異步譜都顯示了較大的差別。
3小結
近年來,紅外光譜技術是受到人們特別重視和發展相當迅速的光譜分析方法之一。通常在780~3 100 nm的近紅外光譜區內,主要受到分子中CH, OH, NH基團的倍頻和合頻的吸收。
本研究采用清華大學研發的二維相關分析技術,通過變溫過程中引起大黃的相關結構變化規律,取得高分辨的二維譜圖,進行真偽大黃化學成分差異的分析來鑒別藥材的真偽,該法通過相關軟件進行研究,操作簡單,結論準確,不失為鑒別藥用植物的真偽的一種簡單實用的新方法。
參考文獻
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[3]湯彥豐,張卓勇,范國強. 中草藥大黃的近紅外光譜和人工神經網絡鑒別研究[J].光譜學與光譜分析,2004, 24(11): 1348~1351
[4]周群,李靜,劉軍,等. 真偽大黃的二維相關紅外光譜[J].分析化學,2003, 31(9): 1058~1061
[5]湯彥豐,張卓勇,范國強,等.基于大黃的紅外光譜的人工神經網絡鑒別研究[J].光譜學與光譜分析,2005, 25(5): 715~718